目的 了解胶原Ⅲ肾小球病临床表现、病理特点和遗传方式。方法 总结分析2例通过肾脏病理确诊为胶原Ⅲ肾小球病的同胞兄弟临床、病理资料以及家系调查结果。 结果 2例患者分别为33、34岁男性，发病时为32、31岁，临床均表现为大量蛋白尿（１例为肾病综合征）、高血压、肾功能不全（Scr分别为128、313 μmol／Ｌ），均有左心室肥厚，无血尿、骨骼改变和其他肾外体征。血浆前胶原Ⅲ浓度均异常增高（＞50 ng／Ｌ）。光镜均表现为系膜区明显增宽，肾小球基底膜（GBM）增厚，部分呈假双轨改变，免疫荧光均为阴性。电镜下GBM弥漫增厚，内皮细胞侧及系膜区可见大量粗大的平行排列成束胶原纤维沉积，直径在60～100 ｎｍ之间。Ⅲ型胶原免疫荧光均为强阳性，沿GBM和系膜区沉积。家系调查显示该同胞兄弟父母为近亲婚配，其同胞妹妹无临床肾脏改变，但其血浆前胶原Ⅲ同样显著升高（＞50 ng／Ｌ）。 结论 家族性胶原Ⅲ肾病罕见，家系调查符合常染色体隐性遗传方式，国内目前尚无胶原Ⅲ肾小球病家系报道。

目的 通过对有近亲婚配史的Alport综合征一家系Ⅳ型胶原α3和α4链的 COL4A3/COL4A4 基因分析，明确常染色体隐性遗传Alport综合征的基因突变,为该病的基因诊断和家系遗传咨询提供更为全面的理论基础｡ 方法 PCR扩增先证者DNA COL4A3/COL4A4 基因的共98个外显子，经直接测序，寻找突变位点，对有意义的突变经限制性内切酶AvaⅡ酶切在家系中分析验证｡ 结果 在该患者中共发现1个错义突变和10个序列变异｡其中在COL4A3 基因上发现一个位于42号外显子上的错义突变 G3725A,导致蛋白质Gly1242Asp的突变｡错义突变在患者中是纯合子，携带者中是杂合子，其他正常家系成员及筛查100条正常人染色体，未发现该突变｡10个序列变异为单核苷酸多态性改变｡ 结论 报道了一个国内较少见的常染色体隐性遗传Alport 综合征家系，同时经基因突变筛查发现Ⅳ型胶原α3链的一个新的致病性的基因突变｡

目的 通过检测3个Fabry病家系基因突变类型明确基因诊断，并进行家系成员的基因型检测｡方法 通过PCR和直接测序的方法,对3个Fabry家系的先证者及部分家系成员外周血DNA进行α-半乳糖苷酶A编码GLA基因7个外显子及其相邻内含子的DNA序列检测｡结果 (1)先证者1的GLA基因7号外显子内1142位点发生碱基缺失(1142delG),1142位碱基G的缺失导致蛋白质翻译在390位氨基酸提前终止，该突变国内外均未见报道；(2)先证者2的GLA基因6号外显子内902位点存在1个错义突变,碱基G被A取代,导致其编码的第301位氨基酸由精氨酸变为谷氨酰胺(902G>A,R301Q)；(3)先证者3的GLA基因3号外显子内484位点存在1个错义突变，碱基T被C取代,导致其编码的第142位氨基酸由半胱氨酸变为精氨酸(484T>C，C142R)｡在3个家系的部分成员中进行基因检测，检出GLA突变基因携带者共6例，其中男性半合子1例，女性杂合子5例，突变类型均与相应先证者符合｡100条正常X染色体对照中均未发现上述位点异常｡ 结论 本研究在3个Fabry病家系中检出3种GLA基因突变，其中1142delG为新发现的突变，并在3个家系的部分家系成员中检出男性半合子1例，女性杂合子5例｡

目的 通过在真核细胞中表达突变基因，探讨NPHS2基因突变对podocin分子表达和分布的影响｡方法 构建分别含有野生型NPHS2编码区cDNA､467-468insT和503G>A突变NPHS2编码区cDNA的表达载体，分别转染人胚肾细胞(HEK293)后用抗podocin氨基端多克隆抗体(P21)和抗podocin羧基端多克隆抗体(P35)进行免疫荧光染色,在共聚焦显微镜下观察podocin在细胞内的分布｡结果 与野生型NPHS2编码的podocin分子的表达和分布比较，抗podocin氨基端抗体染色显示，两个突变NPHS2表达的podocin与野生型的一样均为阳性；抗podocin羧基端抗体染色显示503G>A突变NPHS2表达的podocin与野生型的一样为阳性，而467-468insT突变NPHS2表达的podocin呈阴性｡野生型NPHS2表达的podocin不但分布在胞核的周围，而且主要在细胞膜上呈连续性的线状分布，而两个突变NPHS2表达的podocin主要分布在胞核周围｡结论 NPHS2的467-468insT突变将严重影响podocin的分子结构和在细胞内的正常分布｡NPHS2的503G>A突变即使没有严重影响podocin的结构，但仍然导致podocin不能正常到达细胞膜，因而不能行使正常功能｡podocin的正常功能不但有赖于分子结构也有赖于分子分布｡

目的 探讨多囊蛋白1氨基端肽(PC-1NTP)对常染色体显性多囊肾病(ADPKD)肾囊肿衬里上皮细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响&#65377;方法 用噻唑蓝(MTT)法检测PC-1NTP对ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖的影响&#65377;用流式细胞仪分析细胞周期与凋亡状况&#65377;用荧光定量PCR检测细胞中细胞周期素cyclinD1、p21WAF1、 bax、bcl-2 和小染色体维护蛋白2(MCM-2)的mRNA表达&#65377;结果 PC-1NTP使ADPKD囊肿衬里上皮细胞G0/G1期细胞百分比显著增多，S期细胞百分比显著减少，并明显抑制其增殖和凋亡；同时细胞中p21和bcl-2 mRNA表达明显增高(P < 0.01),cyclinD1、bax 和MCM-2的mRNA表达明显减弱(P < 0.01或P < 0.05)&#65377;结论 PC-1NTP能明显抑制ADPKD囊肿衬里上皮细胞的增殖和凋亡，减慢细胞周期进程，其作用机制可能是通过调节G1/S关卡调节因子cyclinD1/p21WAF1和凋亡调节蛋白bcl-2/bax的表达实现的&#65377;PC-1NTP有希望成为治疗ADPKD的可选药物&#65377;

目的 观察儿童期肝糖原贮积症(GSD)的肾脏并发症&#65377;方法 回顾性分析1993年1月-2004年1月北京协和医院108例病历完整的GSD患儿的肾脏损害的临床特点、治疗和预后&#65377;年龄≤10岁73例，10岁以上35例&#65377;病例随诊时间1~10年，随诊期间给予生玉米淀粉为主的综合治疗&#65377;结果 临床诊断GSD-Ⅰa型54例(23例进行了基因诊断)；Ⅲ型29例(5例进行了基因诊断)；分型不明的25例&#65377;16例(20.8%)尿蛋白增多，发现蛋白尿时平均年龄11.3(3~21)岁，2例15岁女孩24 h尿蛋白定量已达1.3 g和3.8 g,同时伴有肾功能轻度受损&#65377;51/72例(70.8%)尿β2-MG增多，为175~10 623 mg/L&#65377;5例患儿(4.6%)出现肾结石或高尿钙症，发生时年龄17.8(11~21)岁;4/5例肾绞痛伴肉眼血尿，1/5例无症状;随诊发现镜下血尿及大量草酸钙结晶，24 h尿钙456.6 mg,B型超声证实双肾多发结石&#65377;10/17例Ccr降低(48~76.9 ml/min)；2/17例Ccr升高(156.9~1819 ml/min)&#65377;5/91例BUN升高(7.4~9.3 mol/L)；1/91例Scr升高(106.1 μmol/L)&#65377;结论 GSD的肾脏合并症在儿童期已可以见到，主要表现为尿蛋白增多(白蛋白及肾小管蛋白)和肾石症，直至肾功能不全，症状随年龄增大而逐渐出现&#65377;应加强GSD患儿肾脏并发症的随诊&#65377;

目的 探讨血及尿内皮素1 (ET-1)&#65380;白介素6 (IL-6)应用于动脉粥样硬化性肾动脉狭窄(ARAS)筛查的可能性&#65377;方法 检测49例不同狭窄程度的ARAS患者, 32例合并≥2项动脉粥样硬化危险因素的非ARAS患者及30例正常对照的血及尿ET-1&#65380;IL-6水平,构建其诊断ARAS的受试者工作特征曲线(ROC曲线)&#65377;结果 尿ET-1&#65380;尿IL-6及尿ET-1/血ET-1比值与肾动脉狭窄程度相关&#65377;在用于诊断狭窄程度≥50%的ARAS患者时,其ROC曲线下面积分别为0.792&#65380;0.756及0.779&#65377;尿ET-1以6.72 ng/mmol肌酐为界值时,诊断ARAS的敏感度为80.0%,特异度为72.8%&#65377;尿ET-1/血ET-1比值以12.59为界值时,敏感度为66.7%,特异度为61.7%&#65377;而尿IL-6以23.85 ng/mmol肌酐为界值时,敏感度为73.3%,特异度为70.4%&#65377;若采用系列研究方法,尿IL-6以12.60ng/mmol肌酐为界值并联用高血压这一临床指标时,敏感度和特异度可提高至80.0%与77.8%&#65377;结论 尿ET-1及尿IL-6有应用于ARAS筛查的可能性&#65377;

目的 分析2型糖尿病患者出现肾脏病变时病理诊断与临床表现的关系&#65377;探讨肾活检在2型糖尿病伴有肾脏病变诊断的意义&#65377;方法 分析52例尿检异常和(或)Scr升高的2型糖尿病患者的临床特征和病理改变特点&#65377;结果 52例2型糖尿病患者经肾活检,32例确诊为糖尿病肾病(DN),占61.5%,其中3例为糖尿病肾病合并非糖尿病性肾脏疾病(NDRD);余20例为非糖尿病性肾脏疾病,占38.5%&#65377;肾活检前后诊断符合率46.15%,误诊率19.23%&#65377;两组间除BUN&#65380;Scr&#65380;糖尿病病程和是否伴有糖尿病性视网膜病变有显著差异外,其他临床表现和实验室检查的差异均无统计学意义&#65377;结论 2型糖尿病伴肾脏病变时相当部分是非糖尿病性肾脏病变,单纯依靠临床资料常难以鉴别,肾活检对明确糖尿病伴肾病变的性质具有重要的意义&#65377;

目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞合成纤连蛋白(FN)与整合素连锁激酶(ILK)表达的关系&#65377;方法 培养人肾小管上皮细胞(HKC),用蛋白印迹方法检测TGF-β1诱导HKC 合成FN和表达ILK的作用&#65377;通过基因转染的方法,将含人野生型ILK基因的表达质粒pCMV-wtILK和无激酶活力的人ILK基因表达质粒pCMV-kdILK转染HKC细胞,观察ILK过度表达和抑制ILK活力对TGF-β1诱导的HKC合成FN的影响&#65377;结果 TGF-β1能够刺激HKC合成FN,其作用呈剂量依赖性&#65377;TGF-β1刺激8 h即可上调HKC细胞ILK的表达,与TGF-β1所致的FN合成的增加相一致&#65377;转染pCMV-wtILK质粒的HKC细胞,其FN的表达呈增加趋势&#65377;转染pCMV-kdILK抑制ILK的活力能够显著拮抗TGF-β1刺激HKC表达FN的作用&#65377;结论 TGF-β1刺激肾小管上皮细胞FN合成与其所致的ILK表达密切相关&#65377;抑制ILK的活力能够拮抗TGF-β1导致的FN合成&#65377;

目的 研究ATP耗竭再恢复诱导的肾小管上皮细胞凋亡中, 半胱氨酸天冬氨酸 (caspase) 3 激活介导bcl-2 降解的作用&#65377;方法 使用代谢抑制剂短暂阻断细胞内ATP的生成,诱导细胞凋亡&#65377;以Hoechst 33342染色观察凋亡细胞&#65377;应用编码人bcl-2 RNA的腺病毒感染细胞,使bcl-2在细胞内高表达&#65377;应用流式细胞仪,分析细胞凋亡和坏死的发生情况&#65377;以Western印迹检测caspase 3的活化以及bcl-2和bcl-2的降解产物&#65377;体外实验观察caspase 3和 caspase 3特异性抑制剂DEVD对bcl-2 降解产物的影响&#65377;结果 高表达bcl-2组与对照组比较,细胞ATP耗竭60 min&#65380;90 min&#65380;120 min 和再恢复 60 min后, 可减少细胞凋亡50%,P<0.05&#65377;肾小管上皮细胞ATP耗竭时, caspase 3被激活,bcl-2出现降解;细胞内ATP恢复时,bcl-2 降解产物继续增多,并出现细胞凋亡&#65377;体外应用caspase 3可使bcl-2降解,而caspase3的特异性抑制剂DEVD能明显抑制caspase 3对bcl-2的降解&#65377;结论 肾小管上皮细胞ATP耗竭再恢复时, caspase 3激活及其介导的bcl-2降解在细胞凋亡中发挥重要作用&#65377;

目的 了解足细胞上晚期糖基化产物受体(RAGE)激活后的细胞内信号的传导途径&#65377;方法 激光共聚焦显微镜观察细胞内反应性氧自由基(ROS)的产生&#65377;Western印迹方法检测足细胞内丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)家族磷酸化,RT-PCR方法检测单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的mRNA表达&#65377;结果 足细胞细胞核内存在基础性的ROS,AGE和羧甲赖氨酸(carboxymethyllysine,CML)分别诱导细胞浆内ROS增加2.2和2.6倍&#65377;N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)抑制基础性和诱导性ROS形成,RAGE中和抗体则完全抑制诱导性的ROS产生&#65377;NAC也可直接抑制CML以及外源性H2O2诱导的MCP-1的表达&#65377;使用CML刺激足细胞10 min后,磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)增加3.8倍&#65377;而CML刺激足细胞120 min仍没有发现磷酸化的p38MAPK和应激活化蛋白激酶(SAPK)/氨基末端激酶(JNK)表达或上调&#65377;使用NAC,7氨4三氟甲基香豆素(AFC)可以完全防止ERK磷酸化并抑制MCP-1的mRNA表达&#65377;PD98059阻断了ERK磷酸化却并不能完全抑制MCP-1的mRNA的表达&#65377;结论 足细胞上RAGE激活后,通过ROS-p21Ras-ERK信号途径诱导足细胞表达MCP-1&#65377;