目的 评价现有在中国人群基础上开发的肾小球滤过率(GFR)评估方程在慢性肾脏病(CKD)患者的适用性。 方法 选择327例CKD患者，用中国方程、瑞金方程分别预测GFR值，与体表面积标准化99mTc-DTPA测的GFR（sGFR）进行比较。 结果 Bland-Altman分析显示瑞金方程估计的GFR和sGFR的一致性最好，但所有方程估计的GFR和sGFR的一致性限度均超过事先规定的专业界值。线性回归结果显示，瑞金方程和MDRD-1方程估测的GFR与X轴的斜率较其他方程更小。在所有方程中，瑞金方程估测GFR 15%符合率、30%符合率和50%符合率均最高，但瑞金方程估测GFR 30%符合率依然低于70%。在CKD的不同分期中，瑞金方程估测GFR 15%符合率、30%符合率和50%符合率均较高。 结论 当血肌酐的测定方法为酶法时，如果直接应用目前在中国人群基础上开发出的GFR评估方程预测GFR，可能会产生明显的偏差。有必要进行更大规模试验，进一步评估和验证中国方程和瑞金方程在中国人群的适用性。

目的 调查上海城市脑血管疾病住院患者的慢性肾脏病（CKD）发生情况及其并发症，从而有助高危人群中CKD的早发现、早诊断和早治疗。 方法 收集上海市瑞金医院、第九人民医院、新华医院、解放军第八五医院、仁济医院5家医院神经内科2007年6月至2008年2月间住院的脑血管疾病患者的临床资料。所有患者均分别经脑CT、脑血管CT（CTA）、磁共振成像（MRI）、脑血管MRI（MRA）及经颅多普勒超声（TCD）确诊。对患者进行肾脏损伤指标（Scr、尿常规+沉渣镜检、尿微量白蛋白/肌酐比值）及相关危险因素（血压、空腹血糖、餐后2 h血糖、血脂、胸部X线片、心电图等）的检测。Scr检测统一在瑞金医院检验中心进行。采用MDRD复杂公式估算GFR，并根据K/DOQI指南进行CKD分期。 结果 共调查脑血管疾病住院患者1014例，男性559例，女性455例，平均年龄（68.56±12.17）岁。病因依次为缺血性脑血管疾病（708例）、出血性脑血管疾病（197例）和短暂性脑缺血发作（TIA）（109例）。11.2%的患者伴有微量白蛋白尿(MAU)，而24.8%患者为显性蛋白尿。脑血管疾病患者的CKD患病率为47.7%；CKD 1~5期分别占该人群的6.90%、14.69%、21.60%、2.56% 和1.97%。多因素Logistic回归提示，影响脑血管疾病患者短期（30 d）预后的危险因素为蛋白尿（OR = 1.69，P = 0.0005）、空腹血糖升高（OR = 1.67，P = 0.0005）和贫血（OR = 1.37，P = 0.04）。 结论 首次在我国进行脑血管疾病人群中肾功能情况调查分析，报道了上海脑血管疾病人群中CKD流行病学数据。脑血管疾病住院患者中CKD的发生率为47.7%。对该人群进行CKD评估，尤其是在早期进行尿微量白蛋白/肌酐比值（ACR）筛查尤为重要。

目的 调查合肥市成年体检人群慢性肾脏病（CKD）的患病情况及相关危险因素。 方法 回顾性分析2005年1月至2007年12月在安徽省立医院体检中心的所有年龄大于20周岁的人群体检资料，进行慢性肾脏病患病率和危险因素调查。 结果 在资料完整的33 451例成年体检者中，蛋白尿的患病率为2.74%（95% CI为2.57%~2.92%）；血尿的患病率为7.67%（95% CI为7.39%~7.96%）；肾小球滤过率下降的患病率为0.80%（95% CI为0.71%~0.90%）。该人群总CKD患病率为9.92%（95% CI为9.60%~10.25%）。 结论 合肥市体检人群中，CKD的患病率为9.92%；CKD的相关危险因素包括年龄、女性、糖尿病、高血压和高尿酸血症。

目的 探讨特发性局灶节段性肾小球硬化症（FSGS）的肾小球上皮细胞增生病变（glomerular epithelial proliferative lesion，GEPL）的临床意义及其组织学来源。 方法 2000年1月至2005年12月间在本研究所接受治疗的特发性FSGS患者共74例，按照是否存在GEPL病变分为两组：GEPL组31例，非GEPL组43例。分析两组患者的临床病理特点，对其活动性及慢性化病理改变进行半定量评估，并对患者的治疗和预后进行随访。通过免疫组化方法分析肾小球增生上皮细胞的细胞表型表达情况。 结果 与非GEPL组相比，GEPL组的病程显著较短（P < 0.05）；肾病综合征（NS）患者比例显著较高（P < 0.05）；节段性硬化的肾小球比例显著较高（P < 0.05）；病理活动性评分显著较高（P < 0.05）；慢性化评分显著较低（P < 0.05）。29例随访患者中，GEPL组（16例）的肾脏存活率明显降低（P ＝ 0.049）。COX回归分析发现GEPL和Scr水平是导致肾衰竭的危险因素（OR值分别为1.204和1.008）。免疫组化结果显示肾小球增生上皮细胞WT-1及Pcx表达缺失；细胞增殖核抗原（PCNA）、Pax-2和CK-8表达阳性。 结论 特发性FSGS的肾小球上皮细胞增生病变是急性期、活动性病变的病理表现，也可能为临床病情较重和肾脏存活预后不良的病理学指征。增生的肾小球上皮细胞缺乏足细胞表型，说明可能源于壁层上皮细胞，但不排除损伤的足细胞去分化、增生并表达壁层上皮细胞标记的可能。

目的 研究他克莫司（TAC，FK506）在儿童原发性肾病综合征中的临床应用。 方法 65例患儿入院后根据不同的临床类型联合激素或逐渐减用激素，同时给予口服他克莫司，剂量0.1～0.15 mg/kg，每12小时１次,疗程6～24个月，并监测血药浓度。 结果 65例患儿经他克莫司治疗1～2个月后，尿蛋白逐渐减少；血清白蛋白迅速增加并恢复正常；胆固醇、三酰甘油均有不同程度的改善；总缓解率83.1％；显效时间为7～54 d。随访中12例出现复发。细胞亚群CD4增高时缓解率高。他克莫司药物代谢基因型为3/3型或3/1型缓解率高。微小病变型肾病（MCN）缓解率为96.4％；系膜增生性肾炎（MsPGN）为90.0％；膜性肾病（MN）为2/3；膜增生性肾炎（MPGN）为3/5；局灶节段性肾小球硬化症（FSGS）为4/9。他克莫司起始剂量为0.1～0.15 mg/kg，每12小时１次，治疗浓度控制在5～10 g/L时，本组患儿可获得缓解。12例出现厌食、恶心、呕吐；1例腹痛；2例头痛；1例震颤；3例失眠；4例出现一过性Scr上升；8例N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）轻微增加；6例C3与α-2巨球蛋白增加。部分患儿在1周内恢复正常，其他患儿在他克莫司减药后症状消失。 结论 他克莫司对原发性肾病综合征患儿有良好的疗效，即使患儿肝功能异常、并发结核感染或有严重激素不良反应。他克莫司可替代环孢素A作为新的治疗用药。

目的 将胚胎后肾间充质细胞移植到大鼠右肾包膜下，探讨移植细胞对宿主急性肾小管坏死（ATN）的保护作用。 方法 体质量相近的SD大鼠按随机数字表法分为正常对照（n＝24）、ATN（n＝35）、ATN加假手术（n＝37）、ATN加培养基（n＝36）、ATN加细胞移植（n＝29）共5组。首剂庆大霉素注射后第5、8、11、14天每组分别取6只大鼠处死，留取血和肾组织标本。4,6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）示踪法观察移植细胞的分布。全自动生化分析仪检测Scr和尿NAG酶水平。HE染色法进行肾组织病理评分。免疫组化染色检测肾皮质Ki-67和Bcl-2阳性表达细胞，分别计算增殖指数和Bcl-2蛋白的相对表达量。TUNEL法检测肾皮质细胞的凋亡指数。 结果 胚胎后肾间充质细胞被扩增，波形蛋白染色阳性，角蛋白染色阴性，符合未分化的间充质细胞的特点。与ATN组、ATN加假手术、ATN加培养基组大鼠比较，ATN加细胞移植组大鼠Scr和尿NAG酶较低[第14天 Scr：(101.38±20.46) μmol/L比(248.78±23.15)、(252.98±33.52)、(229.08±18.18) μmol/L；NAG酶：(14.83±7.74) U/L比（33.33±14.88）、（29.62±10.54）、（30.22±10.94）U/L，均 P < 0.05]；右肾皮质病理积分降低（P < 0.05）；肾小管上皮细胞增殖增加（P < 0.05），凋亡减少（P < 0.05）；Bcl-2蛋白表达水平上调（P < 0.05）。 结论 肾包膜下移植胚胎后肾间充质细胞能够修复损伤的肾脏，改善肾功能。

目的 探讨内质网应激在白蛋白超负荷诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用和分子机制。 方法 Western印迹法检测肾小管上皮细胞（HKC）内质网伴侣蛋白糖调节蛋白78（GRP78）和内质网应激蛋白CHOP（CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白，也称为GADD153）表达与人血清白蛋白（HSA）作用时间和浓度的关系。实时荧光定量PCR法检测CHOP siRNA对CHOP基因转录的抑制情况。Western印迹法检测CHOP siRNA转染后CHOP蛋白水平的变化。膜联蛋白V和碘化丙锭（Annexin V-FITC和PI）双染的流式细胞术检测白蛋白诱导HKC凋亡的变化以及CHOP siRNA对HKC凋亡的影响。 结果 （1）分别以0、5、10、20 g/L白蛋白作用于HKC 24 h，GRP78、CHOP蛋白表达及细胞凋亡均随白蛋白浓度的增加而上调，各组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）；以20 g/L白蛋白分别作用于HKC 0、6、12、24、36 h，GRP78蛋白表达在6 h即显著增加，CHOP蛋白表达及HKC凋亡则在12 h显著增加，各组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。（2）CHOP siRNA显著抑制白蛋白诱导的CHOP 基因转录及蛋白表达（P ＜ 0.01），对白蛋白诱导的HKC凋亡有显著抑制作用（P ＜ 0.01）。 结论 白蛋白超负荷可诱导肾小管上皮细胞发生内质网应激，并通过上调促凋亡因子CHOP表达引起肾小管上皮细胞内质网相关的细胞凋亡，这可能是蛋白尿引起肾小管间质病变的重要机制。

目的 探讨血管紧张素I型受体阻断剂氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应及转化生长因子β1(TGF-β1)产生的影响。 方法 以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象，分别给予氯沙坦（10-5 mol/L）和（或）NADPH氧化酶抑制剂联二亚苯碘锚（DPI，10-5 mol/L）预处理1 h后再加入AngⅡ（10-7 mol/L）刺激24 h，同时设立空白培养基作为对照组。实时定量PCR和Western印迹法分别检测4组细胞NADPH 氧化酶p22phox、p47phox、Nox-4 mRNA和蛋白水平及TGF-β1 mRNA水平。用2，7- 二氯荧光素双乙酸盐（H2DCF-DA）作为荧光探针，采用荧光分光光度仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平。应用比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）水平。 结果 AngⅡ（10-7 mol/L）刺激细胞15 min后开始产生大量的ROS，至60 min达平台期。单纯AngⅡ刺激1 h后，NRK-52E细胞上清液中SOD水平显著低于对照组（27.31 μU/L 比48.29 μU/L，P < 0.01）；经氯沙坦预处理1 h后再加入AngⅡ刺激1 h细胞上清液中SOD水平升高至36.37 μU/L，与AngⅡ组差异有统计学意义（P < 0.01）。单纯AngⅡ刺激NRK-52E细胞24 h可显著上调NADPH氧化酶p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA和蛋白水平，其mRNA水平分别为对照组的5.57倍、5.55倍和9.41倍（均P < 0.01），蛋白水平分别为对照组的4.53倍、4.17倍和6.50倍（均P < 0.01）。经氯沙坦干预后，p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA水平分别为对照组的2.71倍、2.18倍和5.23倍（均P < 0.01），蛋白水平分别为对照组的3.20倍、2.30倍和4.30倍（均P < 0.01）。AngⅡ刺激细胞24 h后TGF-β1 mRNA表达也显著增多，为对照组的4.36倍（P < 0.01），氯沙坦处理细胞后TGF-β1 mRNA水平为对照组的1.57倍。 结论 氯沙坦通过抑制NADPH氧化酶的表达和增加SOD的表达减少ROS的产生，并能通过减少ROS产生，抑制AngⅡ诱导的TGF-β1 mRNA水平增高。

目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导下的大鼠肾间质成纤维细胞（NRK-49F）增殖、凋亡及其相关蛋白的影响。 方法 用5 μg/L的TGF-β1作用于NRK-49F。不同浓度（0~5 μmol/L）MG-132预处理NRK-49F细胞后，MTT法检测细胞增殖；应用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率；DNA凝胶电泳法观察细胞的凋亡情况；Western印迹检测p53、p27、p21、caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的变化。 结果 TGF-β1（5 μg/L）可促进NRK-49F细胞增殖，而MG-132（0.25~5 μmol/L）呈剂量依赖性地抑制这种效应，使细胞生长停滞在G1期。TGF-β1（5 μg/L）单独不能诱导NRK-49F的凋亡（3.880%±0.365%比4.723%±1.582%），而MG-132（0.10、0.25、0.50、0.75、1.00、2.50 μmol/L）预处理可呈剂量依赖性地促进细胞凋亡（调亡率分别为8.8％、18.7％、22.8％、31.3％、37.7％、38.9％）。MG-132（2.5 μmol/L）+TGF-β1组及 MG-132（2.5 μmol/L）组在DNA电泳中呈典型的梯状条带现象。Western印迹结果显示，MG-132可剂量依赖性地激活TGF-β1诱导的细胞周期及凋亡相关蛋白p53蛋白表达，促进caspase-3的活性片段产生，Bcl-2表达下调，并能使Bax和p21表达上调，但对p27没有明显的影响。 结论 MG-132可抑制TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞增殖，并促其凋亡。该作用可能与MG-132对细胞周期及凋亡相关蛋白p53、p21、caspase-3、Bcl-2和Bax的调节有关，提示泛素蛋白酶体抑制剂可能成为将来防治肾间质纤维化的一个潜在的治疗手段。

目的 观察前列腺素E2（PGE2）对肾脏球旁器颗粒细胞（JGG）肾素分泌的调节作用。 方法 将小鼠肾脏致密斑细胞株（MMDD1）种植在特殊滤器上，滤器上下（细胞顶侧和基底侧）分别用不同培养基培养细胞，改变细胞顶侧培养基中钠离子、氯离子和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度，分别测定不同时间点滤器上、下PGE2浓度。腹腔注射卡托普利（30 mg/kg）前后，放射免疫法测定野生型和环氧化酶基因敲除（COX-2-/-）小鼠血浆肾素活性(PRA)变化；原代分离COX-2-/-小鼠JGG，测定细胞上清肾素活性及其对PGE2刺激的反应。实时定量PCR测定低肾素（JGG细胞特异性Gsα基因缺失）小鼠肾脏皮质COX-2 mRNA表达。免疫组化法检测肾皮质COX-2蛋白表达。代谢笼中留取24 h尿，ELISA方法测定PGE2水平。 结果 (1)低氯刺激能使致密斑细胞分泌PGE2，不论基底侧还是细胞顶端PGE2浓度均显著增加（均P < 0.05）；但AngⅡ对致密斑分泌PGE2没有显著影响；(2)COX-2-/-小鼠基础PRA[（378.3±96.4）比（1115.0±210.0） ng AngI&#8226;ml-1&#8226;h-1，P ＝ 0.0051，n＝10]和JGG细胞肾素分泌[（153.7±14.7）比（672.4±129.0） ng AngI&#8226;ml-1&#8226;h-1，P ＝ 0.0162，n＝3]显著低于相同遗传背景的野生型小鼠；卡托普利能刺激COX-2-/-小鼠PRA增加32.8倍；PGE2能部分恢复COX-2-/-小鼠原代JGG细胞分泌肾素功能；(3)PGE2受体EP4耦联的Gsα基因敲除的低肾素小鼠，肾脏皮质COX-2 mRNA表达增加（8.07±1.08)倍（n=6，P = 0.0022)，免疫组化显示致密斑和远端小管COX-2蛋白表达增加，24 h尿PGE2分泌增加[（1235±152） pg/24 h 比（385±140） pg/24 h，P = 0.0065]。 结论 致密斑PGE2直接受低氯调节，COX-2-/-小鼠基础肾素减少；下游的AngⅡ能直接作用于JGG细胞而不是致密斑负反馈调节肾素分泌。阻断JGG细胞自身的肾素产生（Gsα基因敲除）后，能负反馈上调致密斑的COX-2表达，故COX-2-PGE2-肾素在球旁器存在近距离精确调控机制。

目的 探讨红细胞生成素（EPO）对高糖诱导下的肾小管上皮细胞转分化的影响。 方法 体外培养人肾小管上皮细胞株（HK-2细胞），分为正常对照组、渗透浓度对照组、高糖组、高糖＋EPO（5 U/ml）组和高糖＋EPO（10 U/ml）组。RT-PCR法检测各组细胞α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1）、Smads信号蛋白2（Smad2）及整合素连接激酶（ILK）的mRNA表达。细胞免疫荧光法检测细胞TGF-β1及α-SMA的蛋白表达。 结果 RT-PCR结果显示，相对于对照组，高糖组细胞α-SMA、TGF-β1、Smad2、ILK的mRNA表达均显著上调（P ＜ 0.01）。细胞免疫化学也显示，高糖组TGF-β1和α-SMA的蛋白表达较对照组显著上调（P ＜ 0.01），而高糖＋EPO（5 U/ml）组和高糖＋EPO（10 U/ml）组上述指标的表达均显著低于高糖组（均P ＜ 0.01）。 结论 EPO能抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化，可能与其抑制TGF-β1、Smad2及ILK表达有关。

目的 研究黄芪甲苷对体外培养的足细胞黏附功能的保护作用及机制。 方法 条件性永生的小鼠足细胞分为正常糖组、高糖组、甘露醇高渗对照组及高糖＋黄芪甲苷组 （AS-Ⅳ），分别用荧光定量法和物理离心法观察不同剂量（10、50、100 mg/L)及不同作用时间（3、6、12、24 h）的AS-Ⅳ对足细胞黏附功能的影响。实时定量PCR法及Western印迹法分别检测足细胞α3β1整合素mRNA和蛋白表达。 结果 与正常糖对照组比较，高糖组足细胞与基底膜蛋白复合物（BMC）间的黏附功能显著下降（P < 0.05），而AS-Ⅳ能明显改善高糖刺激下的足细胞黏附功能（P < 0.05），且呈剂量和时间依赖关系。此外，高糖组足细胞α3β1整合素mRNA及蛋白表达水平均显著低于正常糖组（P < 0.05），而AS-Ⅳ能呈剂量和时间依赖性上调高糖刺激下的足细胞?琢3β1整合素mRNA及蛋白表达。 结论 AS-Ⅳ对体外培养的高糖刺激下的足细胞黏附功能有明显保护作用，其机制可能与AS-Ⅳ上调α3β1整合素mRNA及蛋白表达水平有关。