目的 评估不同蛋白量饮食对维持性血液透析（MHD）患者营养情况及骨矿物质代谢的影响。 方法 本研究包括横断面研究及前瞻性队列研究两部分，患者分成每日蛋白摄入量（DPI）≥1.2 g?kg-1?d-1组（HP组）和DPI＜1.2 g?kg-1?d-1组（NP组），队列研究以研究起点的DPI进行分组。横断面研究收集华山医院血液净化中心126例MHD患者的一般情况、饮食情况及生化指标，评估不同蛋白摄入量的MHD患者营养及骨矿物质代谢情况。前瞻性队列研究入选本血透中心饮食稳定的MHD患者32例，随访两年，每3月随访患者饮食情况，同时检测血生化指标，并于研究起点及终点行人体测量，评估长期不同蛋白量饮食对MHD患者营养情况及骨矿物质代谢的影响。 结果 横断面研究中HP组患者DPI为（1.36±0.14） g?kg-1?d-1，NP组DPI为（1.04±0.09） g?kg-1?d-1，HP组患者DPI、每日能量摄入（DEI）、标准化氮表现率相当蛋白（nPNA）、血磷均显著高于NP组，二氧化碳结合力（CO2CP）显著低于NP组（均P＜0.05）。两组患者血红蛋白、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、血钙、全段甲状旁腺素（iPTH）差异均无统计学意义。前瞻性队列研究中HP组患者DPI为（1.35±0.13） g?kg-1?d-1，NP组DPI为（1.05±0.11） g?kg-1?d-1。随访期间各项目不同时间点差异均无统计学意义（均P时间＞0.05），HP组患者DPI、nPNA、血磷显著高于NP组，CO2CP显著低于NP组（均P分组＜0.05）。但两组患者血红蛋白、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、体重指数（BMI）、上臂肌围、三头肌皮脂厚差异均无统计学意义。 结论 对营养情况良好的MHD患者，DPI控制在1.05 g?kg-1?d-1左右能满足患者营养的一般需求，并能减轻高磷血症及酸中毒。

目的 探讨综合医院体外循环（CPB）心脏外科手术患者术后急性肾损伤（AKI）的发病率以及危险因素。 方法 回顾性分析北京协和医院233例介绍CPB心脏瓣膜术和冠状动脉旁路移植术患者的临床资料，应用相关性分析和logistic多因素回归分析方法筛选影响患者术后发生AKI的危险因素。 结果 233例患者平均年龄（57±12）岁，其中合并糖尿病54例（23.2%）；高血压105例（45.1%）；基础肾功能不全21例（9%）；贫血51例（21.9%）。术后AKI的总发生率为32.2%，其中术后48 h内诊断的AKI和术后48 h至7 d内诊断的AKI的构成比分别为84%和16%。相关性分析结果表明，术前基础肾功能不全、贫血、左室射血分数（LVEF）、术中主动脉阻断时间、平均动脉压（MAP）、围手术期感染、应用万古霉素等因素与患者术后发生AKI相关。多因素logistic回归分析结果提示，术前基础肾功能不全（OR=9.498，P=0.001）、贫血（OR=3.150，P=0.021）、LVEF（OR=1.733，P=0.045）、术中主动脉阻断时间（OR=2.227，P=0.026），术后血WBC（OR=3.357，P=0.032）是影响患者发生术后AKI的独立危险因素。 结论 术后AKI是接受CPB心脏手术患者常见的并发症之一，改善患者围手术期心、肾功能，纠正贫血，预防感染是降低CPB心脏瓣膜搭桥术后AKI发生的可行性措施。

目的 探讨肾动脉钙化对糖尿病肾病（DN）进展的影响及骨形态生成蛋白2（BMP2）信号通路激活在DN大鼠肾动脉钙化中的作用。 方法 60只SD雄性大鼠随机分为对照组（CON组）、DN组、DN合并血管钙化组（DN+VDN组），DN组及DN+VDN组大鼠分别给予高脂高糖饮食加链脲菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，成模后DN+VDN组给予维生素D3肌注及尼古丁灌胃，分别于成模后8、12、16周处死大鼠，留取血、尿标本检测肾功能、血糖以及24 h尿蛋白水平。Von Kossa染色观察大鼠肾动脉钙盐沉积情况，钙离子试剂盒检测肾动脉组织钙含量。HE染色观察肾脏病理改变，免疫组化检测肾动脉上BMP2/Smad1/ Runx2/Osterix信号蛋白表达，实时定量PCR测定BMP2和Runx2的mRNA表达。 结果 DN组及DN+VDN组大鼠肾动脉的钙含量及钙盐沉积较同期CON组显著增加，且DN+VDN组较DN组增加更明显（P＜0.05）。DN组及DN+VDN组大鼠肾功能指标随时间的推移逐渐升高，且明显高于同时间CON组（P＜0.05）。与DN组相比，DN+VDN组大鼠各时间点胱抑素C水平均增高（P＜0.05），24 h尿蛋白量于16周后差异有统计学意义（P＜0.05）。DN组及DN+VDN组大鼠肾组织病理损伤较CON组呈进行性加重，且DN+VDN组大鼠的病理改变更明显。此外，DN及DN+VDN组组大鼠BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号蛋白及BMP2、Runx2 mRNA水平均较同时间点CON组升高（P＜0.05），且DN+VDN组增高更明显（P＜0.05）。相关性分析表明，肾动脉钙含量与血清尿素氮、肌酐、胱抑素C、24 h尿蛋白量以及BMP2、Runx2 mRNA均呈正相关（r=0.835、0.705、0.829、0.897、0.641、0.683，均P＜0.01）。 结论 肾动脉钙化的发生及严重程度可能参与和促进了DN的进展，而其中BMP2信号通路激活在DN肾动脉钙化中起重要的调节作用。

目的 通过狼疮肾炎（LN）小鼠模型，探讨功能性磁共振成像（MRI）在评估肾功能损害、肾脏病理改变及肾内缺氧状态中的作用。 方法 自发性LN模型MRL/lpr小鼠13只，对照组C57BL/6小鼠10只，检测尿白蛋白/肌酐比值（ACR）、血肌酐（Scr）、抗ds-DNA抗体和补体C3水平；14~16周龄小鼠处死前进行肾脏横断面T1加权像（T1WI）、T2加权像（T2WI）、扩散加权成像（DWI）及血氧水平依赖法（BOLD）成像。处死前1 h腹腔注射缺氧探针，采用免疫组化、Western印迹法检测小鼠肾组织中缺氧探针（HypoxyprobeTM-1）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和血红素加氧酶1（HO-1）的分布。 结果 MRL/lpr小鼠的尿ACR、Scr和抗ds-DNA抗体水平均显著高于对照组，LN模型小鼠肾组织中HypoxyprobeTM-1、HIF-1α和HO-1广泛分布，且在肾髓质的小管间质呈弥漫分布，并与肾小管间质病变密切相关。肾脏功能MRI示LN组平均表观扩散系数（ADC）为（1.52±0.27）×10-3 mm2/s，皮质和髓质R2*值分别为（30.95±4.59）/s和（23.43±3.06）/s，均低于对照组（P分别为0.037、0.030、0.043）。当b=500 s/mm2和800 s/mm2时，髓质ADC值与尿ACR呈负相关（r=-0.364，P=0.032；r=-0.329，P=0.050），皮质ADC值与血肌酐亦呈负相关（r=-0.814，P=0.014；r=-0.755，P=0.031），平均R2*值与尿ACR、肾小管间质病变程度及肾组织缺氧指标表达均呈负相关（均P＜0.05）。 结论 肾内缺氧可能在LN肾小管间质病变发生中具有重要作用。无创性的功能性MRI可监测LN小鼠的肾功能变化、肾脏病理改变及肾内缺氧情况。

目的 探讨核因子-κB受体活化因子（RANK）在足细胞损伤中的作用及其对蛋白尿的影响。 方法 用Cre-LoxP重组酶系统建立足细胞RANK特异性敲除小鼠（RANK-/-，KO组），琼脂糖电泳法鉴定其基因型。设野生型小鼠（WT）和普通C57小鼠（各6只）为对照组。用脂多糖（LPS）腹腔注射方法建立短暂蛋白尿小鼠模型。检测各组小鼠尿白蛋白，尿肌酐等指标；模型建立后48 h处死小鼠取肾脏行病理检查。免疫组化法检测肾脏足细胞数量；电镜下观察足细胞足突融合情况；免疫荧光法检测整合素（integrin）β1及integrin β3等相关蛋白表达变化； Western印迹法检测integrin β1、integrin β3及尿激酶型纤溶酶原激活物受体（uPAR）等相关蛋白的表达变化。 结果 3组小鼠均于造模后第2天出现明显蛋白尿，KO组小鼠尿白蛋白/肌酐比值明显低于对照组WT组及C57组[（23.70±9.90）比（107.56±22.32）；（23.70±9.90）比（132.13±14.26），P＜0.001]，差异有统计学意义。免疫组化结果显示，造模后3组小鼠足细胞数量均有减少，KO组小鼠足细胞减少程度比其他两组轻。电镜结果亦显示，造模后KO组小鼠足细胞足突融合程度较对照组轻。免疫荧光结果显示，与造模前组相比，造模后各组小鼠肾组织integrin β1表达均有下降，KO组较对照组下降幅度更大；integrin β3表达升高，KO组升高幅度较对照组较少（均P＜0.05）。Western印迹结果显示，与造模前组相比，造模后各组小鼠肾组织integrin β1表达均下降，KO组小鼠下降幅度更大；各组小鼠integrin β3及uPAR表达均升高，KO组升高幅度较其余两组较小（均P＜0.05）。 结论 敲除小鼠足细胞特异性RANK基因后可以减少LPS诱导的蛋白尿，提示RANK参与了由足细胞损伤导致蛋白尿的发生，其机制与调节integrin β1，integrin β3及uPAR等分子的表达有关。

目的 探讨他克莫司（FK506）对2型糖尿病（T2DM）大鼠足细胞的保护作用及其可能机制。 方法 高糖高脂喂养联合小剂量链佐星（STZ）构建T2DM大鼠模型，模型大鼠随机分为糖尿病组（DM组）和FK506组，后者给予0.5 mg?kg-1?d-1 FK506干预8周，另设正常对照组。比较各组大鼠的生化指标，光镜、电镜分别观察肾脏病理和足细胞超微结构改变，免疫组织化学检测nephrin蛋白表达，Western印迹测定自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）的表达。 结果 （1）与对照组比较，DM组大鼠肾小球肥大指数（KW/BW）、空腹血糖（FBG）、血压（SBP）、胆固醇（CH）、三酰甘油（TG）、内生肌酐清除率（Ccr）、24 h尿白蛋白排泄率（UAE）均明显升高（均P＜0.05），而FK506组大鼠KW/BW、Ccr、UAE均明显低于DM组（均P＜0.05），其他指标差异均无统计学意义。（2）与对照组比较，光镜下DM组大鼠肾小球体积增大，肾小球系膜细胞及系膜区基质增多；电镜下DM组大鼠足细胞数量减少，足突融合、消失。而FK506干预后上述病变明显减轻。（3）与对照组比较，DM组大鼠肾组织nephrin及LC3-Ⅱ表达均降低（均P＜0.05），而FK506组大鼠组nephrin及LC3-Ⅱ表达高于DM组（均P＜0.05）。 结论 FK506可能通过上调T2DM大鼠肾脏足细胞的自噬作用保护足细胞。

目的 探讨胰高血糖素样肽（GLP-1）类似物利拉鲁肽对糖尿病大鼠肾组织的保护作用及相关机制。 方法 40只雄性SD大鼠随机分为四组：正常对照组（NC组）、正常对照+利拉鲁肽组（NCL组）、糖尿病组（DM组）、糖尿病+利拉鲁肽组（DML组）。利拉鲁肽200 μg?kg-1?d-1治疗8周后，观察大鼠肾脏组织病理形态学改变，检测大鼠体重、血糖、肾脏指数（KI）、糖化血红蛋白（HbA1c）、尿蛋白/肌酐比值（A/C）等生化指标；实时定量PCR检测大鼠肾组织Ⅳ型胶原蛋白（COL-IV）、转化生长因子β1（TGF-β1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6的mRNA表达；Western 印迹检测大鼠肾组织GLP-1受体（GLP-1R）、COL-Ⅳ、NF-κB表达和ERK、JNK、p38MAPK磷酸化水平变化。 结果 与NC组相比，DM组大鼠HbA1c、KI、A/C水平较高（P＜0.01），炎性相关细胞因子TGF-β1、MCP-1、TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增加（P＜0.05），COL -Ⅳ积聚增多（P＜0.05），肾组织细胞核内NF-κB蛋白表达增加（P＜0.05），ERK、JNK、p38MAPK磷酸化水平升高（P＜0.05），同时GLP-1R的表达下降（P＜0.05）。DML组大鼠尿蛋白排泄减少（P＜0.01），TGF-β1、MCP-1、TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达被抑制（P＜0.05），COL-Ⅳ水平下降（P＜0.05），ERK、JNK的磷酸化水平明显被抑制（P＜0.05），p38MAPK蛋白的磷酸化水平无明显改善，同时NF-κB在胞核内表达减少（P＜0.05）。 结论 利拉鲁肽对糖尿病大鼠具有一定的肾脏保护作用，可能与抑制ERK、JNK/NF-κB介导的炎性反应有关。

目的 探讨两种剂量胸腺素β4（thymosin β4，Tβ4）对肾小管间质纤维化大鼠转化生长因子β（TGF-β）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响，并进一步评估各组肾小管间质损伤和肾功能。 方法 应用单侧输尿管梗阻(UUO)手术建立大鼠模型。将健康成年的雄性SD大鼠随机分为4组，每组15只：假手术组（Sham组）、UUO模型组、低剂量组（UUO术后给予1 mg/L Tβ4治疗）、高剂量组（UUO术后给予5 mg/L Tβ4治疗）。模型组和Sham组术后给予等量生理盐水灌胃。观察术后第2周各组肾功能（24 h尿蛋白量、尿素氮和血肌酐）和肾组织病理学改变，应用原位杂交和 Western印迹分别检测肾小管间质中TGF-β、CTGF的mRNA和蛋白表达。 结果 与Sham组比较，模型组肾组织有高水平TGF-β、CTGF mRNA及蛋白表达均降低（均P＜0.01）；与模型组比较，两Tβ4组TGF-β和CTGF的mRNA、蛋白表达（均P＜0.01），高剂量组比低剂量组下降更明显（P＜0.05）。且TGF-β mRNA表达与CTGF mRNA表达呈正相关（r=0.697，P＜0.01）。模型组大鼠24 h尿蛋白量及肾小管间质损伤面积比Sham组明显增加；Tβ4能改善这种肾脏损害，Tβ4组24 h尿蛋白量及肾小管间质损伤面积均低于模型组，而且高剂量组比低剂量组的效果更显著（均P＜0.05）。各组血肌酐及血尿素氮差异无统计学意义。 结论 Tβ4可能以剂量依赖的方式抑制肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/CTGF表达，从而发挥肾脏保护作用。

目的 观察Klotho基因和钠磷共转运体在5/6肾切除（残肾）加高磷诱导的慢性肾衰竭大鼠模型血管和肾脏中的表达及其与血管钙化的关系；探讨硫代硫酸钠（STS）早期干预减轻血管钙化的机制。 方法 35只SD雄性大鼠动物被分为5组：（1）假手术+正常磷饮食（SNP）组；（2）假手术+高磷饮食（SHP）组；（3）残肾+正常磷饮食（NNP）组；（4）残肾+高磷饮食（NHP）组；（5）残肾+高磷饮食+STS治疗（THP）组。各组大鼠分别接受5/6肾切除（n=21）或假手术（n=14），术后分别给予高磷或正常磷饮食16周；STS治疗组给予STS腹腔注射，每周3次。16周后，测量各组大鼠尾动脉血压，检测血肌酐、血钙、血磷、成纤维细胞生长因子23（FGF23）、全段甲状旁腺素（iPTH）和24 h尿蛋白量。Von kossa染色法检测胸主动脉钙化程度；免疫组织化学法检测血管Klotho和钠磷共转运体Pit-1表达；PASM-Masson染色观察肾组织病理改变；实时定量PCR法检测肾组织Klotho和NaPi-2a mRNA表达。 结果 与SNP大鼠相比，NHP组大鼠动脉血压、血肌酐、血磷、FGF23、iPTH水平和24 h尿蛋白量明显升高（均P＜0.05）。与NHP组相比，THP组大鼠血压、Scr、血磷、FGF23、iPTH水平和24 h尿蛋白量明显下降（均P＜0.05）。16周后NHP组肾组织呈现慢性肾衰竭病理改变。SNP和SHP组大鼠主动脉未见明显钙化；NHP组大鼠主动脉呈现严重钙化；与THP组相比，NHP组大鼠血管钙化明显减轻（P＜0.05）。与SNP组相比，NHP组大鼠主动脉和肾脏Klotho表达明显减少，Pit-1和NaPi-2a表达明显增多（均P＜0.05）；与NHP组相比，THP组大鼠主动脉和肾组织的Klotho表达明显增加（均P＜0.05），Pit-1和NaPi-2a表达明显减少（均P＜0.05）。 结论 STS早期干预可调节5/6肾切除加高磷诱导的慢性肾衰竭大鼠血管和肾脏Klotho与钠磷共转运体的表达。STS有纠正血磷紊乱、减轻血管钙化、改善肾功能的作用。

目的 探讨甲基双加氧酶（TET）2在高糖诱导肾小球系膜细胞转化生长因子β1（TGF-β1）表达中的作用。 方法 将人肾小球系膜细胞分为正常对照组（5.5 mmol/L葡萄糖）、高糖（30.0 mmol/L葡萄糖）组，分别观察12～72 h。用小分子化学物质SC1抑制系膜细胞TET2基因表达，分为高糖组（30.0 mmol/L葡萄糖+DMEM）、二甲亚砜（DMSO）组（30.0 mmol/L葡萄糖+终浓度0.1%DMSO）、SC1组（30.0 mmol/L葡萄糖+终浓度3 μmol/L SC1）。采用实时荧光定量PCR、Western印迹法分别检测TGF-β1、TET1～3、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的mRNA及蛋白水平。亚硫酸盐修饰后测序法（BSP）检测TGF-β1基因启动子及第一外显子区CpG岛的甲基化。噻唑蓝比色法（MTT）检测系膜细胞增殖情况。 结果 与正常对照组比较，高糖诱导系膜细胞TET2 mRNA和蛋白表达升高，且存在时间依赖效应（均P＜0.05），但TET1和TET3的表达在两组间差异无统计学意义（均P＞0.05）。同时发现高糖组TGF-β1基因第一外显子区4个CG位点出现持续去甲基化，24～72 h甲基化率均低于对照组（均P＜0.01），而启动子区甲基化水平无明显变化。与高糖组比较，TET2抑制剂SC1组高糖诱导的TGF-β1第一外显子区CpG岛去甲基化降低（即甲基化率升高），TGF-β1和α-SMA mRNA和蛋白表达均降低，系膜细胞增殖下调（均P＜0.05）；DMSO组与高糖组上述各项差异均无统计学意义。 结论 TET2可能通过催化TGF-β1基因第一外显子区的DNA去甲基化参与高糖诱导系膜细胞TGF-β1表达及细胞表型转化。