目的    总结中国7个家系的家族性肾性糖尿（FRG）患者的临床特点，验证和分析FRG 患者及其亲属Na+-葡萄糖协同转运蛋白2（SGLT2）基因突变位点，探讨FRG患者的基因型和表型的相关关系。 方法    检测7个家系FRG先证者及其一级亲属共23名家庭成员（其中14例患者）24 h尿糖及血尿生化指标。PCR法扩增SGLT2全部编码区及其侧翼序列，用直接测序法分析SGLT2基因突变位点。 结果    SGLT2基因测序结果发现5个新的基因突变。包括4个错义突变：8号外显子第335位丝氨酸突变为甘氨酸（p.S335G，c.1003A＞G）；11号外显子第448位谷氨酰胺突变为精氨酸（p.Q448R，c.1343A＞G）；474位的丙氨酸突变为脯氨酸（p.A474P，c.1420G＞C）；13号外显子第580位甘氨酸突变为天冬氨酸（p.G580D，c.1739G＞A）；1个7号内含子缺失突变c.886（-10_-31）del，该突变经迷你基因（pSPL3外显子捕获质粒）验证为剪切突变。14例患者c.886（-10_-31）del的突变等位基因频率为43%（12/28）。纯合或复合杂合突变的患者表现为中重度肾性糖尿，杂合突变的患者表现为轻中度肾性糖尿，符合共显性遗传特点。 结论    我们发现5种新的突变基因型与中国人群家族性肾性糖尿相关，c.886(-10_-31)del可能为中国人群的高频突变基因。

目的    评价美国慢性肾脏病流行病学协作组（chronic kidney disease epidemiology collaboration，CKD-EPI）报道的2009年CKD-EPI肌酐（Scr）方程（CKD-EPI_2009Scr）、2012年CKD-EPI胱抑素C（SCysC）方程（CKD-EPI_2012SCysC）和2012年CKD-EPI Scr-SCysC方程（CKD-EPI_{2012Scr-SCysC}）3种肾小球滤过率（glomerular filtration rate，GFR）预测方程是否适用于评估我国糖尿病肾病（DN）患者的GFR。 方法    收集2012年6月至2014年4月于广州市第一人民医院住院且行^99mTc-DTPA肾动态显像法测定GFR的共108例DN患者资料，以^99mTc-DTPA肾动态显像法测定的GFR作为GFR参考值（rGFR），用CKD-EPI_2009Scr方程、CKD-EPI_2012SCysC方程和CKD-EPI_{2012Scr-SCysC}方程估算GFR（分别记为eGFR1、eGFR2、eGFR3），采用Pearson相关分析及信度分析比较各方程eGFR与rGFR的相关性；采用卡方检验和Kappa检验分别比较各方程的30%准确性和分期一致性；采用配对样本t检验、Bland-Altman图比较各方程eGFR与rGFR的偏差和偏离程度；绘制ROC曲线比较各预测方程的诊断准确度。 结果    108例DN患者的rGFR水平为（66.13±23.89） ml•min^-1•(1.73 m²)^-1。各预测方程eGFR与rGFR显著相关，相关系数分别为0.738、0.708、0.782（均P＜0.01）。各预测方程eGFR 与rGFR的30%准确性分别为74.07%、52.78%、67.59%，eGFR1和eGFR3均高于eGFR2（均P＜0.05），eGFR3与eGFR1差异无统计学意义（χ²=0.874，P=0.436）。各预测方程eGFR与rGFR分期一致性Kappa检验结果显示，各预测方程eGFR与rGFR分期一致性均不理想，Kappa值分别为0.391、0.180、0.422。配对样本t检验结果显示， eGFR3与rGFR的差异无统计学意义（t=0.90，P=0.367），eGFR1低估rGFR，eGFR2高估rGFR（均P＜0.01）。Bland-Altman图结果显示，3个公式与rGFR一致性均不佳，eGFR3与rGFR的偏离程度最小。ROC曲线结果显示，各预测方程eGFR的曲线下面积（AUC）分别为0.878、0.883、0.915。 结论    CKD-EPI_2009Scr方程、CKD-EPI_2012SCysC方程和CKD-EPI_{2012Scr-SCysC}方程预测的eGFR与rGFR的相关性、准确性和诊断准确度均良好，但一致性不佳。相对而言，CKD-EPI_{2012Scr-SCysC}方程可能优于CKD-EPI_2009Scr方程和CKD-EPI_2012SCysC方程，但一致性限度均超过了可接受的专业限值。因此应用此3种CKD-EPI方程预测我国DN患者的GFR尚需更大样本及多方面的研究验证或进一步改良。

目的    分析新疆地区社区获得性急性肾损伤（CA-AKI）与医院获得性急性肾损伤（HA-AKI）患者的临床特点。 方法    应用医院网络系统筛选新疆医科大学第一附属医院2013年1月至7月19 528例成人住院患者临床资料。根据改善全球肾脏病预后组织（KDIGO）指南重新确认544 例AKI患者组成研究队列，回顾性分析CA-AKI组与HA-AKI组（214例）患者的临床资料及全因死亡率。 结果    住院患者AKI发生率为2.8%（544/19 528），其中CA-AKI组为1.7%（330/19 528），HA-AKI组为1.1%（214/19 528）。CA-AKI组患者平均年龄大于HA-AKI组[（62.9±16.8）岁 比（56.6±15.9）岁，P＜0.01]。CA-AKI组中62.4%为内科患者，HA-AKI组中64.1%为外科患者。两组合并的基础疾病主要包括心脏疾病、高血压、糖尿病和慢性肝病。肾前性因素在两组均占明显优势。CA-AKI组住院时间明显少于HA-AKI组[12（8，20） d比19（12，27） d，P＜0.01]，全因死亡率亦明显低于HA-AKI组（11.5%比20.1%，P=0.005）。多因素Logistic逐步回归结果提示，ICU住院情况和休克是CA-AKI组和HA-AKI组患者死亡的独立危险因素；糖尿病（OR=3.019）是CA-AKI组患者死亡的独立危险因素；高龄（≥65岁）（OR=3.303）、少尿（24 h尿量＜400 ml）（OR=6.906）、使用解热镇痛药（OR=13.079）及存在多器官功能不全综合征（OR=17.778）是HA-AKI组患者死亡的独立危险因素。 结论    住院患者中AKI的发生并不少见，其中CA-AKI与HA-AKI均主要由肾前性病因引起。HA-AKI组全因死亡率明显高于CA-AKI组，两组预后的独立危险因素各不相同。

目的    探讨血清骨硬化蛋白（sclerostin）与维持性血液透析（maintenance hemodialysis，MHD）患者冠状动脉钙化（coronary artery calcification，CAC）的关系。 方法    纳入2014年1月至2015年1月于本院血液净化科进行MHD的患者92例。检测血清sclerostin，采用多层螺旋CT（MSCT）进行冠状动脉扫描，计算冠状动脉钙化评分（CAC score，CACs）。Logistic回归分析MHD患者CAC的影响因素。受试者工作特征（receiver-operating characteristic，ROC）曲线分析sclerostin对冠状动脉钙化的诊断价值。 结果    92例MHD患者中CAC（CACs＞100）的患病率为65.2%（60/92），CACs中位数为446（26，1 000）分，血清sclerostin中位数为37.05 （29.99，49.04） ng/L。将CACs分为3组（＜100组，100～400组，＞400组），CACs＞400组的血清sclerostin水平明显高于CACs＜100组[40.71（36.69，74.21） ng/L 比28.16（25.27，33.64） ng/L，P＜0.05]。Logistic回归分析发现slcerotin是CAC的独立危险因素（OR=1.292，95%CI 1.017～1.641，P＜0.05）。ROC曲线分析发现，sclerostin诊断CAC的曲线下面积（AUC）为0.846（95%CI为0.717～0.975，P=0.001），sclerostin诊断冠状动脉钙化的临界值为35.165 ng/L，其灵敏度为0.826，特异度为0.769。 结论    血清sclerostin水平和CAC的严重程度相关，高水平的sclerostin是CAC的独立危险因素。Sclerostin可能对MHD患者CAC具有诊断价值。

目的    观察支架蛋白JLP基因缺失对单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾间质纤维化的影响，探讨JLP在梗阻性肾病肾纤维化形成中的作用和可能机制。 方法    将jlp野生型（jlp^+/+）小鼠和jlp敲除（jlp^-/-）小鼠分为4组：jlp^+/+假手术组（jlp^+/+-Sham）；jlp^-/-假手术组（jlp^-/--Sham）；jlp^+/+模型组（jlp^+/+-UUO）和jlp-/-模型组（jlp^-/--UUO）。分别于术后7 d和14 d处死小鼠。Masson染色观察肾间质纤维化改变；免疫荧光、免疫组化及Western印迹法观察JLP在各组小鼠肾组织的表达与分布；免疫组化法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原纤维（COL-Ⅰ）、Ⅲ型胶原纤维（COL-Ⅲ）、转化生长因子β1（TGF-β1）表达；Western印迹检测肾组织α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3蛋白表达。 结果    jlp^+/+小鼠肾组织表达JLP，主要分布于肾小管。Masson染色结果显示，与jlp^+/+-UUO组比较，jlp^-/--UUO组肾间质胶原纤维增加，纤维化程度加重（均P＜0.05）。免疫组化结果显示，与jlp^+/+-UUO组比较，jlp^-/--UUO组小鼠肾皮质α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ和TGF-β1表达明显升高（均P＜0.05）。Western印迹结果显示，与jlp^+/+-UUO组比较，jlp^-/--UUO组α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ和TGF-β1蛋白表达明显升高（均P＜0.05），p-Smad2和p-Smad3蛋白表达也明显升高（均P＜0.05）。 结论    支架蛋白JLP在预防肾纤维化的形成中起重要作用，这一作用可能是通过抑制TGF-β1的表达和肌成纤维细胞生成来实现的。

目的    观察高糖对骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophages，BMDM）激活的影响，并探讨转化生长因子β激活激酶1（TGF-β activated kinase-1，TAK1）信号通路在其中的作用机制。 方法    分离获取小鼠BMDM，运用流式细胞术鉴定BMDM细胞纯度。高糖作为刺激因素，TAK1特异性抑制剂5Z-7-oxozeaenol作为干预因素，分别设正常对照组（1640培养基）、渗透浓度对照组（25 mmol/L甘露醇）、高糖组（33 mmol/L葡萄糖）和高糖+抑制剂组（33 mmol/L葡萄糖+300 nmol/L 5Z-7-oxozeaenol）。采用细胞免疫荧光和流式细胞术检测BMDM M1表型，实时定量PCR检测各组细胞单核细胞趋化因子1（MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA水平，Western印迹法检测各组磷酸化（p）-TAK1、TAK1结合蛋白（TAK1 binding protein，TAB1）、p-JNK、p-p38 MAPK和NF-κB p65蛋白的表达。 结果    BMDM诱导分化成功，其纯度达99.36%。10～300 nmol/L 5Z-7-oxozeaenol对高糖环境中BMDM细胞活性无影响（均P＞0.05）。与正常对照组比较，高糖组M1型巨噬细胞增加，MCP-1、TNF-α mRNA水平均上调（均P＜0.01），p-TAK1、TAB1、p-JNK、p-p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达也显著升高（均P＜0.05）；TAK1特异性抑制剂5Z-7-oxozeaenol作用均能抑制高糖诱导产生的效应（均P＜0.05）。 结论  高糖能诱导BMDM向M1表型转化，TAK1特异性抑制剂5Z-7-oxozeaenol可能通过抑制TAK1/MAPKs和TAK1/NF-κB通路，抑制巨噬细胞M1型活化和炎性因子的表达。

目的    通过研究高糖和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）环境下人肾小管上皮细胞Toll样受体4（TLR4）表达及其相关的炎性和纤维化因子的变化及TLR4 siRNA的干扰作用，从天然免疫角度探讨糖尿病肾病（DN）发病机制和靶向干预措施。 方法    设计并合成3对针对人TLR4基因的特异性siRNA片段，以带有红色荧光的BLOCK-IT Alexa Fluor作为阴性对照，荧光显微镜下观察细胞转染效率，实时定量PCR 检测TLR4 mRNA 的表达变化。确定TLR4 siRNA 基因沉默效果较佳后再进一步实验。实验分2部分进行，第1部分细胞分3组：正常糖对照组（NG，5.5 mmol/L葡萄糖）、甘露醇组（M，5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇）和高糖组（HG，25 mmol/L葡萄糖），初步验证高糖、高渗的影响。第2部分7组：NG组、HG组、AngⅡ（10^-7 mmol/L）组、AngⅡ+空载体对照组、HG+空载体对照组、AngⅡ+TLR4 siRNA转染组及HG+TLR4 siRNA转染组。采用实时定量PCR 法检测TLR4、髓样分化因子88（MyD88）、热休克蛋白47（HSP47）mRNA的表达；Western 印迹法检测TLR4、MyD88、HSP47、核因子κB（NF-κB）、Ⅳ型胶原蛋白（ColⅣ）的蛋白表达；ELISA 法检测细胞上清液单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、白细胞介素6（IL-6）的水平。 结果    与NG组比较，甘露醇组TLR4、MyD88蛋白表达差异均无统计学意义（P＞0.05）；HG、AngⅡ组TLR4、MyD88、HSP47 mRNA及TLR4、MyD88、NF-κB、HSP47、ColⅣ蛋白表达均显著上调（P＜0.01），细胞上清液MCP-1、IL-6水平亦升高（P＜0.01）；TLR4 siRNA转染后，与HG组或AngⅡ组相比上述指标均显著下调（P＜0.01）；空载体转染后，与HG组或AngⅡ组相比上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论    高糖或血管紧张素Ⅱ均刺激人肾小管上皮细胞TLR4信号并引起天然免疫应答，导致炎性和纤维化因子上调。特异性基因沉默可通过阻断由高糖或AngⅡ诱导的TLR4信号，下调炎性及纤维化因子释放。TLR4信号可能是高糖或高肾素环境下人肾小管上皮细胞天然免疫应答的共同关键通路。

目的    观察不同浓度整合素连接激酶（ILK）抑制剂QLT0267对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（TEMT）的作用及其机制。 方法    体外培养人近端肾小管上皮细胞（HK-2），建立TEMT模型，排除高浓度渗透压对TEMT的影响后， 将HK-2细胞分为6组，分别给予不同浓度葡萄糖（GS）及QLT0267干预48 h。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况，计算细胞增殖抑制率；免疫荧光法检测细胞ILK、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达；Western印迹法检测细胞ILK、蛋白激酶B （AKT）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、α-SMA、E钙黏蛋白（E-cadherin）的表达。 结果    （1）与对照组相比，高糖组细胞ILK、p-AKT、α-SMA表达增高（均P＜0.05），E-cadherin表达降低（P＜0.05）。（2）与高糖组相比，浓度大于5 μmol/L QLT0267处理组的细胞增殖抑制率降低（P＜0.05）。（3）与高糖组相比，随着QLT0267浓度的增加，HK-2细胞p-AKT、ILK、α-SMA表达量逐渐降低（均P＜0.05），        E-cadherin表达量逐渐增高（P＜0.05）。 结论    高糖可诱导HK-2细胞TEMT；ILK抑制剂QLT0267可能通过阻止ILK下游蛋白活化，部分抑制细胞增殖，延缓HK-2细胞TEMT进程。