目的    评估环磷酰胺（CTX）冲击联合糖皮质激素治疗特发性膜性肾病（IMN）患者的疗效，分析治疗早期临床相关指标对治疗后缓解或复发的预测价值。 方法    采用回顾性队列研究的方法。入选2011年01月01日至2013年12年31日上海交通大学医学院附属仁济医院（东院）肾脏科经肾活检确诊的IMN患者，接受≥6个月的口服糖皮质激素联合静脉CTX冲击治疗。分析患者基线、治疗3个月血、尿生化指标与疗效的相关关系，评估各指标对于治疗后缓解和复发的预测价值。 结果    83例患者入选本研究。中位随访时间为20（12，30）个月。至随访终点有80.7%（67/83）的患者达到缓解，47.0%（39/83）的患者达到完全缓解（CR）。多因素Cox回归分析提示：基线尿蛋白量、治疗3个月尿蛋白量相对于基线值下降率是IMN患者缓解（P＜0.001）和完全缓解（P＜0.001）的独立预测因素。规律随访的患者中，25.9%（14/54）的患者复发。部分缓解是影响IMN患者复发的独立危险因素（HR：40.918，95%CI：5.023-333.355，P=0.001）。部分缓解患者的复发风险是完全缓解者的40.92倍。最常见的不良反应为感染（25/83）和肝酶(5/83)升高，2例（2/83）的患者出现恶性肿瘤。 结论    基线尿蛋白排泄率和治疗3个月尿蛋白量下降率可以预测静脉环磷酰胺冲击联合口服糖皮质激素治疗IMN的疗效。部分缓解与IMN复发独立相关。

目的    探讨电镜下系膜区致密物沉积的特发性膜性肾病（IMN）的临床表现和病理特点。 方法    回顾性分析本院2013年1月至2014年12月经肾活检确诊且具有完整临床资料的46例电镜下系膜区致密物沉积的IMN患者，并与同期住院的29例电镜下无致密物沉积的IMN患者比较，分析其临床及病理特点。 结果    电镜下伴系膜区致密物沉积IMN患者占IMN患者61.3%。与无系膜区致密物沉积的患者比较，伴系膜区致密物沉积患者肾组织光镜下小动脉透明变性多（43.5%比6.9%，P=0.001），小动脉壁增厚多（78.2%比51.7%，P=0.016）；肾组织免疫病理示免疫球蛋白IgA低强度阳性率高（21.7%比0，P=0.007）。两组患者血清学、尿检指标、肾小球病变、肾小管间质病变以及其他免疫病理改变差异均无统计学意义。 结论    电镜下伴系膜区致密物沉积的IMN患者间质血管病变较重，免疫病理除IgG、C3沉积外，伴随系膜区低强度的免疫球蛋白IgA表达比例高。

目的    探讨未成年维持性血液透析（MHD）患者（＜18岁）血压变异情况，分析影响未成年患者透前血压变异（pre-HD BPV）的相关因素。 方法    病例来自2005年10月至2011年10月贵州省人民医院血液透析中心规律透析12个月以上的未成年透析患者。按照未成年患者透前血压变异分为高pre-HD BPV组（17例）及低pre-HD BPV组（16例），比较两组未成年患者的人口学资料、生化指标及心功能指标，多因素多元逐步回归法分析影响未成年患者pre-HD BPV的相关因素。 结果    与低pre-HD BPV组相比，高pre-HD BPV组未成年患者透析期间体质量增长率、透析前收缩压、平均脱水量明显增高；血红蛋白水平明显下降；血磷及全段甲状旁腺激素（iPTH）水平升高（均P＜0.05）。多因素多元逐步回归分析结果提示：pre-HD BPV与透析期间体质量增长率（β=0.165）、透析前收缩压（β=0.259）及iPTH（β=0.187）呈正相关，与Hb水平（β=-0.199）呈负相关。 结论    未成年MHD患者的BPV受透析期间体质量增长率、透析前收缩压、贫血及继发性甲状旁腺功能亢进的影响。

目的    探讨乌索酸是否通过改善高糖状态下的足细胞自噬抑制，发挥其肾脏保护作用。 方法    体外高糖培养小鼠条件永恒足细胞株，加入PI3K抑制剂LY294002及乌索酸进行干预。RT-qPCR法检测细胞内微小RNA-21（miR-21）和磷酸酶基因（PTEN）的mRNA表达。Western印迹法检测磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/ 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白，自噬相关蛋白及足细胞标志蛋白的表达变化。采用荧光显微镜观察足细胞标志蛋白、内源性微管相关蛋白LC3的表达变化。透射电镜下观察足细胞内自噬体的形成。 结果    与对照组相比，高糖组足细胞自噬相关蛋白LC3II、Beclin1的表达降低，泛素结合蛋白p62（p62/SQSTM1）表达增高；足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低；同时伴miR-21表达上调，PTEN的mRNA和蛋白表达均下调，p85-P13K、磷酸化（p）-Akt、    p-mTOR表达增加（均P＜0.01）。加入LY294002及乌索酸干预后，p85-P13K、磷酸化（p）-Akt、p-mTOR表达减少；足细胞自噬相关蛋白LC3II、Beclin1的表达增加，p62/SQSTM1表达降低；足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低（均P＜0.01），但LY294002对足细胞内miR-21和PTEN的表达无影响。乌索酸可抑制细胞内miR-21的过表达，上调PTEN表达（均P＜0.05）。 结论    高糖可抑制足细胞自噬，促进足细胞损伤。乌索酸干预可减轻高糖刺激下的足细胞自噬抑制，缓解足细胞损伤，其保护机制可能是通过抑制足细胞内miR-21过表达，上调PTEN表达，抑制PI3K/Akt-mTOR信号通路的异常活化实现的。

目的    观察高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein box 1，HMGB1）介导肾小管上皮细胞功能的变化并探讨其机制。 方法    体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK52E），分为空白对照组、HMGB1刺激组以及HMGB1+红假单胞菌脂多糖（Lipopolysaccharide from Rhodobactersphaeroides，LPS RS）刺激组，采用免疫荧光及Western印迹检测Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）表达，流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期变化，Western印迹检测MAPK信号通路及NF-κB激活情况，实时荧光定量PCR检测细胞IL-1、IL-6及组织金属蛋白酶2抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinases 2，TIMP2）mRNA表达水平，蛋白芯片检测IL-1、IL-6及TIMP2蛋白表达水平。 结果    NRK52E细胞表达TLR4。与对照组比较，HMGB1刺激组细胞周期G1期阻滞率高，MAPK信号通路及NF-κB激活，IL-1、IL-6及TIMP2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（均P＜0.05）。TLR4特异性阻断剂LPS RS可以显著抑制HMGB1所介导的效应（均P＜0.05）。 结论    HMGB1与NRK52E细胞上TLR4的相互作用介导肾小管上皮细胞炎性反应，主动合成并释放炎性介质。

目的    探讨抑制哺乳动物不育系20样激酶1（MST1）通路对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病肾病大鼠的保护作用及其机制。 方法    54只雄性健康SD大鼠随机被分为健康对照组（A组，n=18）；MST1抑制组（B组，n=18）；糖尿病模型组（C组，n=18）。采用单侧腹腔注射链脲佐菌素（50 mg/kg）方法制备糖尿病大鼠模型。除接受链脲佐菌素外，B组大鼠接受含MST1干扰RNA序列（shRNA）的慢病毒载体注射；C组大鼠接受空载慢病毒载体注射。造模后4、8、12周为观察时间点，自动生化仪上检测各时间点大鼠24 h尿蛋白量、血糖及血肌酐；HE染色观察肾组织病理改变；透射电镜下观察足细胞及基底膜改变；免疫组织化学方法观察MST1表达强度及定位；Western 印迹法检测肾组织MST1、磷酸化MST1、足细胞相关蛋白nephrin、凋亡相关蛋白半胱天冬蛋白酶（Caspase-3）、肾细胞凋亡相关基因（FasL）等蛋白的表达变化。 结果    （1）3组大鼠各观察时间点血肌酐比较差异无统计学意义（均P＞0.05）；与A组比较，B、C组大鼠造模后72 h血糖明显升高（均P＜0.05）； B、C组间比较，各时间点血糖差异无统计学意义（均P＞0.05）；与C组比较，B组大鼠24 h尿蛋白量在造模后4周明显减少（P＜0.05）。（2）A组大鼠肾组织未见明显病变；B、C组大鼠肾组织可见系膜增生性改变，未见明显K-W结节样改变；电镜下可见足细胞融合、基底膜增厚改变。系膜增生系数（MEI）比较结果示B组病变轻于C组（P＜0.05）。（3）Western印迹结果显示，与A组比较，B、C组大鼠各时间点肾组织MST1、磷酸化MST1、Caspase-3、FasL表达明显增高，nephrin表达明显降低（均P＜0.05）；与同时间点C组比较，B组大鼠肾组织MST1、磷酸化-MST1、Caspase-3、FasL表达降低，nephrin表达增高（均P＜0.05）。（4）免疫组化结果显示，A组大鼠肾小球及间质可见有MST1表达，以肾小管上皮细胞胞质多见；B、C组大鼠肾组织MST1表达均增多，变化趋势与Western印迹结果相似。 结论    MST1通路可能参与了糖尿病肾病的组织损伤，抑制MST1表达可减轻链脲佐菌素诱导的糖尿病模型的肾组织细胞损伤。

目的    观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激对大鼠肾脏及条件永生性小鼠足细胞C末端Src激酶（C-terminal Src kinase，Csk）表达的影响，探讨Csk在AngⅡ诱导足细胞骨架重构中的作用。 方法    24只无特定病原（SPF）级雄性Wista大鼠皮下埋置渗透性微泵，随机分为正常对照组和AngⅡ输注组（AngⅡ以400 ng•kg^-1 •min^-1持续输注），于造模后2周和4周留取肾组织用于后续实验。采用透射电镜观察各组大鼠肾脏足细胞超微结构改变；Western印迹检测各组大鼠 Csk蛋白表达水平；免疫荧光法检测肾脏Csk表达及分布改变。体外培养条件永生性小鼠足细胞（MPC），Western印迹法检测不同浓度AngⅡ（10^-9、10^-8、10^-7、10^-6、10^-5 mol/L）刺激MPC细胞6 h及10^-6 mol/L AngⅡ刺激不同时间（0、1.5、3、6、12、24 h）后足细胞Csk蛋白表达水平。Csk siRNA转染足细胞下调Csk表达，异硫氰酸荧光素（FITC）-鬼笔环肽（phalloidin）标记F-actin评价AngⅡ、细胞松弛素D（Cytochalasin D）诱导的足细胞骨架重构改变。 结果    （1）透射电镜观察发现，AngⅡ输注组大鼠足细胞出现足突融合；（2）免疫荧光及Western印迹显示，AngⅡ输注组肾小球Csk表达增加（P＜0.05）；（3）AngⅡ可诱导培养的小鼠足细胞Csk蛋白表达增加（P＜0.05），且呈时间和剂量依赖性；（4）Csk siRNA转染足细胞下调Csk表达，可减轻AngⅡ诱导的足细胞F-actin重构，可减轻细胞松弛素D诱导的足细胞骨架破坏。 结论    AngⅡ可诱导Csk表达上调，Csk可能参与了AngⅡ诱导的足细胞骨架重构及足突融合。

目的    探讨转化生长因子β激活激酶1（TGF-β activated kinase-1，TAK1）抑制剂（5Z-7-oxozeaenol，OZ）对糖尿病db/db小鼠肾脏的保护作用及机制。 方法    健康雄性db/db小鼠随机分为db/db组（n=12）和db/db+OZ组（n=12），另取WT小鼠（n=12）作为对照组。OZ 2 mg/kg隔日腹腔注射。第8、12周末测定血糖、体质量、肾质量及24 h尿白蛋白排泄率；光镜、电镜观察肾组织病理改变；免疫组化检测NF-κB p65、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）与TNF-α表达；Western印迹检测磷酸化（p）-TAK1、转化生长因子β活化激酶结合蛋白1（TAB1）、p-p38MAPK及白细胞介素1β（IL-1β）蛋白表达；实时定量PCR检测细胞间细胞黏附分子1（ICAM-1）与MCP-1 mRNA表达。 结果    8～12周时db/db小鼠血糖、体质量、肾质量及24 h尿白蛋白排泄率显著高于对照组（P＜0.01），而db/db+OZ组上述指标低于db/db组（P＜0.05）。8～12周db/db小鼠病理形态学表现为肾小球体积增大、细胞外基质增多，TAK1抑制剂可显著改善肾组织病理改变。免疫组化显示8～12周时db/db小鼠肾组织NF-κB p65、MCP-1和TNF-α表达显著高于对照组（P＜0.05），而db/db+OZ组上述指标显著低于db/db组（P＜0.05）。Western印迹结果显示8～12周时db/db组小鼠p-TAK1、TAB1、p-p38MAPK和 IL-1β蛋白表达显著高于对照组（P＜0.05），而db/db+OZ组上述指标低于db/db组（P＜0.05）。实时定量PCR结果显示，db/db小鼠ICAM-1、MCP-1 mRNA表达显著高于对照组（P＜0.01），而db/db+OZ组上述指标显著低于db/db组（P＜0.05）。 结论    TAK1抑制剂可能通过抑制MAPK及NF-κB信号通路来抑制炎性反应，从而减轻糖尿病肾脏损伤。