目的 探讨腹膜透析（腹透）患者发生主动脉弓钙化的危险因素，及主动脉弓钙化对维持性腹膜透析患者预后的影响。 方法 采用回顾性分析的研究方法， 2011年1月1日至2013年12月31日期间上海市第六人民医院的177例维持性腹膜透析患者被纳入研究。按照是否合并主动脉弓钙化将患者分为钙化组（66例）和无钙化组（111例）。收集患者临床资料，评估残余肾功能和透析充分性，采用胸部X线检查评估主动脉弓钙化程度。用二元logistics回归法分析主动脉弓钙化的独立危险因素；Kaplan-Meier生存曲线法分析患者生存预后的影响因素；多变量Cox回归法分析患者死亡风险的独立危险因素。 结果 177例腹膜透析患者主动脉弓钙化的发生率为37.29%（66/177）。血磷升高是主动脉弓钙化的独立危险因素（OR=54.69，95%CI：10.01～298.65，P＜0.01）。轻度与中度+重度钙化组患者的生存率均低于无钙化组。中度+重度主动脉弓钙化是腹透患者全因死亡及心血管疾病死亡的独立危险因素，风险比分别为无钙化组患者的3.779倍和5.636倍。 结论 高磷血症是主动脉弓钙化的独立危险因素；轻度与中度+重度主动脉弓钙化患者的生存率均低于无钙化患者；中度+重度主动脉弓钙化是腹膜透析患者全因死亡及心血管疾病死亡的独立危险因素。
目的 探讨影响腹膜透析（腹透）相关性细菌性腹膜炎患者预后的相关因素。方法 采用回顾性分析的方法。收集上海交通大学医学院附属仁济医院腹膜透析中心2009年1月至2013年12月期间发生的腹透相关性细菌性腹膜炎患者临床资料，包括年龄、性别、腹透龄、残肾功能、局部和全身炎性反应状态、腹透液交换次数、腹膜葡萄糖暴露量等，记录患者腹膜炎发生时相关临床和实验室指标。根据腹膜炎患者预后将其分为治愈组（治疗后完全缓解且无复发、再发或重现）、拔管/死亡组（结局为拔管或死亡）、复发组（含治疗后复发、再发或重现）。采用logistic回归法分析影响腹透相关性细菌性腹膜炎患者预后的相关因素。 结果 187例腹透患者腹膜炎发生时的中位腹透龄为27.15（11.15，53.13）个月，共发生347例次细菌性腹膜炎，其中革兰阳性菌感染130例次，阴性菌71例次，多种微生物感染15例次，培养阴性131例次。与治愈组和复发组相比，拔管/死亡组患者革兰阴性菌感染发生率较高；腹透龄较长；血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）水平较高（均P﹤0.01）。与治愈组相比，拔管/死亡组患者血清白蛋白水平较低（P﹤0.01），复发组患者Kt/V值较低（P﹤0.05）。logistic回归分析结果显示，年龄、非革兰阳性菌感染、hs-CRP升高是影响腹膜炎患者拔管/死亡的独立危险因素。 结论 年龄、非革兰阳性菌感染、全身炎性反应状态是影响腹透相关细菌性腹膜炎患者拔管或死亡的独立危险因素。
目的 分析影响维持性血液透析患者心脑血管并发症预后的相关因素。 方法 研究对象为2009年1月1日至2014年12月31日在中山大学附属第三医院进行维持性血液透析超过3个月患者，记录患者入组时基线及每年度变化的透析相关指标、实验室指标及相关用药情况，随访至出现心脑血管事件或死亡，采用Cox比例风险回归和依时协变量Cox回归分析患者预后的影响因素。 结果 共入组243例维持性血液透析患者，年龄（53.2±16.4）岁，男性138例（56.8%）。经混杂因素调整后，入组基线年龄增长（HR=1.040，95%CI：1.015～1.065，P=0.002）、红细胞生成素剂量减少（HR=0.914，95%CI：0.846～0.987，P=0.022）以及透析治疗开始前合并心脑血管病史（HR=4.045，95%CI：2.074～7.890，P＜0.001）是患者心脑血管预后的独立影响因素。经过基线独立影响因素调整后，血磷升高（HR=1.722，95%CI：1.034～2.866，P=0.037）是患者心脑血管预后的独立依时影响因素。 结论 年龄增长、红细胞生成素剂量减少和透析治疗开始前合并心脑血管病史是维持性血液透析患者心脑血管预后的独立危险因素。血磷升高是维持性血液透析患者心脑血管预后的依时协独立危险因素。
目的 探讨常规球囊扩张失败的动静脉内瘘狭窄应用切割球囊治疗的临床疗效及安全性。 方法 前瞻性选取2011年12月至2015年2月常规球囊行经皮腔内血管成型术（percutaneous transluminal angioplasty, PTA）后残余狭窄＞30%的患者，切割球囊PTA后每3个月复查。 结果 共25例患者，年龄（60.7±12.9）岁，其中自体动静脉内瘘（autogenous arterio-venous fistulas，AVF）11例，移植物内瘘（arterio-venous graft, AVG）14例。切割球囊PTA共30例次，技术成功率86.7%，临床成功率100%。治疗前后血管内径分别为（1.7±0.6） mm和（4.5±0.8） mm（P＜0.05）。6例患者存在多处狭窄。静脉流出道狭窄21例；静脉吻合口狭窄6例；头静脉弓狭窄6例；动脉狭窄2例；人造血管穿刺点狭窄1例。AVF组首次开通率为3个月70.0%，6个月10.0%；AVG组首次开通率为3个月64.3%，6个月7.1%（P＞0.05）。 AVF组再次开通率为3个月70.0%，6个月30.0%；AVG组再次开通率3个月85.7%，6个月64.3%（P＞0.05）。术后随访时间（8.1±7.3）个月，再狭窄率为64.0%。4例次切割球囊PTA后残余狭窄＞30%， 2例植入覆膜支架，2例应用超高压球囊PTA均达到技术成功。内瘘中位生存时间为173 d。 结论 常规球囊扩张失败的严重钙化病变及“球囊腰”病变，切割球囊治疗的近期疗效及安全性值得肯定，经过反复的PTA可维持内瘘远期通畅，但不推荐替代常规球囊而作为一线治疗。切割球囊在AVF和AVG狭窄中的疗效优劣，以及其与高压球囊在效价方面的比较有待大样本、前瞻性、对照研究的结果。
目的 探讨特发性膜性肾病（idiopathic membranous nephropathy，IMN）中肾小球局灶节段性病变（focal segmental lesion，FSL）的临床病理特点及对患者预后的影响。 方法 回顾性分析298例IMN，将其分成不伴FSL组（FSL-组）、伴有早期局灶节段病变组（early focal segmental lesion，EFSL组）及伴有局灶节段肾小球硬化组（focal segmental glomerulosclerosis，FSGS组），比较分析3组患者临床病理及预后间的差异。 结果 病理方面，FSGS组患者伴有肾小管间质慢性病变的比例以及肾小球球性硬化的比例较高，病理分期较晚，与FSL-组和EFSL组比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。临床方面，与FSL-组比较，EFSL组男性比例较高（P＜0.01），血浆白蛋白水平较低（P＜0.05）；而FSGS组病程更长，血压、血肌酐水平较高（均P＜0.05）。3组间EFSL组缓解率较低，生存分析显示，FSGS组病变预后较差（FSGS组比FSL-组，P=0.005；FSGS组比EFSL组，P=0.008）。进行危险因素分析发现肾活检时的三酰甘油水平（OR=1.519，P=0.017）、肾小球球性硬化（OR=1.073，P=0.041）及FSGS病变（OR=5.960，P=0.009 ）是IMN肾脏死亡的独立危险因素。 结论 EFSL有着不同于FSGS的临床及病理表现，伴FSGS病变是IMN肾脏死亡的独立危险因素，同时EFSL组缓解率最低。
目的 初步探讨血管生成素样蛋白3（Angptl3）是否参与肾病综合征高脂血症的发生。 方法 新生小鼠经基因型鉴定得到Angptl3基因敲除鼠（Angptl3-/-）及对照组野生型鼠（WT）各60只，随机将对照组鼠分为盐酸阿霉素组（WT-ADR组）和生理盐水组（WT-Saline组），Angptl3-/-鼠（KO鼠）分为盐酸阿霉素组（KO-ADR组）和生理盐水组（KO-Saline组），每组各分为造模前、造模1周、造模2周、造模4周和造模8周5个时间组，各时间组均6只小鼠。实验组一次性尾静脉注射盐酸阿霉素25 mg/kg，对照组给予等量生理盐水。自动生化分析仪检测血脂指标（胆固醇、三酰甘油），ELISA法检测小鼠尿液中尿蛋白和尿肌酐水平，实时荧光定量PCR法检测野生型小鼠阿霉素造模后肾组织中Angptl3 mRNA表达变化。 结果 （1）与WT小鼠比较，Angptl3-/-小鼠体质量、肾、肝重量及功能均无明显改变；胆固醇（Cho）和三酰甘油（TG）均较低（P＜0.01）。（2）与WT-Saline组比较，WT-ADR组造模第1周出现尿蛋白升高（P＜0.05），血白蛋白降低（P＜0.05），血脂Cho、TG升高（P＜0.05），且血Cho和TG随着造模时间持续升高；Angptl3 mRNA水平在造模第1周起显著高于WT-Saline组（P＜0.05），并持续至第8周(P＜0.01)。肾病模型中，Angptl3 mRNA的相对表达量与血Cho、TG呈正相关（r=0.885，P＜0.01；r=0.788，P＜0.01）。（3）Angptl3-/-小鼠ADR造模后，不同造模时间点血脂（Cho、TG）升高程度均显著低于WT-ADR水平（P＜0.05）。 结论 Angptl3参与肾病综合征高脂血症的发生，敲除Angptl3能一定程度缓解肾病模型血脂紊乱的发生。
目的 探讨微RNA-21（miR-21）对脯氨酸羟化酶2（proline hydroxylase domain 2，PHD2）的调控作用，及其对肾脏晚期缺血预适应（ischemic preconditioning，IPC）小鼠的保护作用。 方法 建立肾脏晚期缺血预适应小鼠模型，分为两组：（1）缺血再灌注组（IR组）：假手术后第4天双侧肾蒂夹闭35 min后恢复灌注；（2）缺血预适应组（IPC组）：第1天双侧肾蒂夹闭15 min，手术第4天处理同IR组。于术后第5天处死所有小鼠，留取血液及肾脏标本。HE染色观察肾组织病理变化；常规生化检测血肌酐（Scr）变化；实时荧光定量PCR法检测肾脏miR-21表达；Western印迹法检测肾组织PHD2和低氧诱导因子1α（HIF-1α）蛋白表达变化。体外给予人肾小管上皮细胞（HK-2）1% O2处理6 h，采用Lipofectamine 2000法转染锁核酸（LNA）修饰的anti-miR-21寡核苷酸抑制miR-21表达，实时荧光定量PCR法检测细胞miR-21、PHD2以及HIF-1α mRNA表达；Western印迹法检测细胞PHD2与HIF-1α蛋白表达。 结果 体内实验结果发现，与IR组相比，IPC组小鼠血肌酐和肾组织病理损伤有明显改善（均P＜0.01）；与IR组相比，IPC组小鼠肾组织miR-21表达上调（P＜0.01）；PHD2蛋白表达下调（P＜0.05），HIF-1α蛋白表达上调（P＜0.05）。体外HK-2细胞低氧模型实验结果提示，抑制细胞miR-21表达可致PHD2蛋白水平明显升高（P＜0.05）。 结论 miR-21对PHD2具有负向调控作用。晚期IPC可能通过诱导miR-21表达，减少PHD2表达，间接上调HIF-1α，对肾脏缺血再灌注损伤起到保护作用。
目的 探讨转录激活因子6（activating transcription factor 6，ATF6）在棕榈酸（palmitic acid，PA）诱导的足细胞（MPC5细胞）凋亡和增殖中的作用。 方法 不同浓度PA刺激足细胞24 h，检测ATF6和激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（Cleaved-caspase3）表达水平及足细胞凋亡情况。腺病毒siATF6转染沉默ATF6后，比较PA诱导的足细胞增殖能力、细胞周期、细胞凋亡和Cleaved-caspase3的蛋白表达水平的变化。采用Western印迹检测Cleaved-caspase3和ATF6蛋白表达水平，流式细胞术检测足细胞凋亡和细胞周期，甲基噻唑基四唑（MTT）法检测细胞增殖，细胞免疫荧光观察ATF6在足细胞中的表达和分布。 结果 与对照组比较，PA诱导组足细胞凋亡明显增加（P＜0.05），细胞Cleaved-caspase3和ATF6蛋白水平随PA浓度增加呈剂量依赖性增高（均P＜0.05）。采用腺病毒siATF6转染足细胞后，PA诱导的足细胞凋亡较空载体转染组减少，细胞增殖增加，S期的细胞比例明显增多，Cleaved-caspase3的表达降低（均P＜0.05）；空载体转染组与PA诱导组在上述指标间的差异均无统计学意义。 结论 ATF6介导棕榈酸诱导的足细胞凋亡。
目的 探讨前列腺素E2（PGE2）受体3亚型（EP3）对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的小鼠肾小球系膜细胞的损伤及可能机制。 方法 体外培养原代野生型系膜细胞，采用脂质体LipofectamineTM 2000化学合成法将siRNA转染至系膜细胞中沉默EP3受体，筛选干扰效率最大的EP3-siRNA片段。实验分组：（1）正常对照组；（2）TGF-β1（10 μg/L）组；（3）NC-siRNA+TGF-β1（10 μg/L）组；（4）EP3-siRNA组；（5）EP3-siRNA+TGF-β1（10 μg/L）组。CCK-8法检测TGF-β1对细胞增殖的影响；ELISA法检测细胞PGE2和cAMP的表达；实时荧光定量PCR法检测纤维连接蛋白（FN）、结缔组织生长因子（CTGF）、环氧化酶2（COX2）、膜结合型前列腺素E2合酶1（mPGES1）mRNA的表达；Western印迹检测FN、CTGF、COX2、mPGES1蛋白表达及ERK1/2、p38 MAPK活性的变化。 结果 与正常对照组相比，TGF-β1组系膜细胞增殖明显增加（P＜0.05），PGE2和cAMP表达增加（均P＜0.05），FN、CTGF、COX2、mPGES1的mRNA和蛋白的表达均上调（均P＜0.05）；与TGF-β1组相比，EP3-siRNA+TGF-β1组系膜细胞增殖减少（P＜0.05），FN、CTGF、COX2、mPGES1的mRNA和蛋白的表达均下调（均P＜0.05）。与正常组比较，TGF-β1组ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平明显增强（均P＜0.05）；而EP3-siRNA+TGF-β1组的ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平较TGF-β1组明显下调（均P＜0.05）。 结论 EP3-siRNA可能通过增加cAMP的产生，抑制ERK1/2、p38 MAPK磷酸化，反馈抑制COX2及PGE2，从而下调FN、CTGF的表达，减轻TGF-β1 诱导的小鼠系膜细胞损伤。
目的 探讨慢病毒介导抑制脂肪源性干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）磷酸二酯酶5（phosphodiesterase 5，PDE5）基因表达对缺血-复氧（ischemia/reoxygenation，I/R）损伤的大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）增殖和凋亡的影响，以及ADSCs自身分泌功能和上皮转化功能的改变。 方法 分离纯化大鼠ADSCs，传代培养及鉴定；构建PDE5-shRNA慢病毒表达载体及阴性对照（NCshRNA），采用慢病毒包装系统介导建立稳定PDE5低表达的ADSCs，Western印迹法检测PDE5蛋白表达；建立肾小管上皮细胞体外I/R模型，并建立ADSCs和NRK-52E细胞的Transwell非接触共培养体系；Edu法检测各组NRK-52E细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡；ELISA法检测各组上清中肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）和成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）水平；实时荧光定量PCR法检测E钙黏蛋白 （E-cadherin）mRNA表达，流式细胞仪检测细胞角蛋白18（Cytokeratin 18，CK18）的表达。 结果 成功构建PDE5-shRNA慢病毒表达载体，筛选并成功建立PDE5稳定低表达的ADSCs细胞系；与正常对照组相比较，I/R组NRK-52E细胞增殖率受到显著抑制，总凋亡率明显增加（P＜0.05），ADSCs共培养上清液中HGF及FGF水平升高（均P＜0.05）；而与阴性对照组相比，与PDE5-shRNA转染组ADSCs共培养的NRK-52E细胞增殖显著增加，凋亡率明显下降，且HGF、FGF水平进一步升高，ADSCs上皮细胞标志物E-cadherin及CK18均表达显著增加，以上差异均有统计学意义（均P＜0.05）。 结论 本研究应用慢病毒载体介导ADSCs稳定低表达PDE5，可能通过促进干细胞分泌多种生长因子，有效改善肾小管细胞I/R状态下增殖及凋亡，同时促进自身向上皮细胞分化，为干细胞体内移植治疗肾脏缺血再灌注损伤中增加肾小管上皮细胞的生存活力、提升干细胞治疗效能提供了初步的实验基础。
