目的    对肾小球轻微病变（glomerular minor lesion，GML）进行临床及电镜病理的分类总结，进一步明确该病理表现的性质及意义，探讨其与临床表现的相关性。 方法    纳入北京协和医院2003年1月7日至2008年12月2日经光镜及免疫荧光病理诊断为GML、同时电镜病理资料完整的患者148例，回顾性分析其临床及病理资料。 结果    孤立性血尿是患者最常见的临床表现，其次为血尿合并少量蛋白尿及单纯蛋白尿，部分患者可并存高血压、特殊自身免疫表现、肝炎标志物阳性等。经电镜检查明确，GML可最终呈现各种不同的病理表现：薄基底膜肾病（66.2%）、系膜增生性肾小球肾炎（20.3%）、Alport综合征（2.7%）、膜性肾病（3.4%）以及正常组织（4.7%）等。结合临床与病理，表现为孤立性血尿的GML患者，经电镜病理检查诊断为薄基底膜肾病的可能性最大（76.9%）。部分患者存在蛋白尿、高血压等提示不良预后的情况。 结论    GML只是一种对肾脏病理表现的粗泛描述，对应的电镜病理具有较大异质性，临床意义各异，需积极完善电镜病理，结合临床特点，明确最终诊断，指导治疗。
   

目的    探讨骨化三醇[1，25（OH）2D3]对局灶增生性IgA肾病（IgAN）患者外周血CD4+记忆性T细胞的影响。 方法    选取局灶增生性IgAN患者（Lee Ⅲ级）20例（IgAN组）及健康志愿者20例（健康对照组）为研究对象。IgAN组再分为尿蛋白量＜1 g/24 h和尿蛋白量  ≥1 g/24 h两亚组。用放射免疫测定法（RIA）检测血清1，25（OH）2D3水平；采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMCs），分别给予不同浓度的1，25（OH）2D3、地塞米松（DEX）或者2种药物联合处理PBMCs，细胞培养72 h后用流式细胞仪检测人干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-4、IL-17A、人叉头框蛋白P3（human forkhead box P3，Foxp3）的变化。结果  与健康对照组相比，IgAN组患者血清1，25（OH）2D3水平显著降低（P＜0.05）；与尿蛋白量＜1 g/24 h亚组及健康对照组比较，尿蛋白量≥1 g/24 h亚组患者血清1，25（OH）2D3水平明显降低（均P＜0.05）。与健康对照组相比，IgAN组患者PBMCs分泌IFN-γ、IL-17A水平及IFN-γ/IL-4、IL-17A/Foxp3比值明显升高，Foxp3水平明显降低（均P＜0.05）；与尿蛋白量＜1 g/24 h亚组及健康对照组比较，尿蛋白量≥1 g/24 h亚组PBMCs分泌IFN-γ、IL-17A水平及IL-17A/Foxp3比值明显升高，Foxp3水平明显降低，IFN-γ/IL-4比值升高（均P＜0.05）。1，25（OH）2D3处理后，PBMCs分泌IFN-γ、IL-17A、IFN-γ/IL-4、  IL-17A/Foxp3水平明显降低，Foxp3水平明显升高，并呈剂量依赖关系（均P＜0.05）；1，25（OH）2D3+DEX联合刺激PBMCs后，上述IFN-γ、IL-17A、IFN-γ/IL-4、IL-17A/Foxp3、Foxp3变化更加显著，且IL-4水平明显降低（均P＜0.05）。 结论    局灶增生性IgAN患者存在维生素D缺乏，并与蛋白尿的严重程度相关；局灶增生性IgAN患者可能存在CD4+记忆性T细胞功能紊乱，1，25（OH）2D3具有纠正局灶增生性IgAN患者CD4+记忆性T细胞功能紊乱的作用。
   

目的    检测溶酶体相关膜蛋白2（LAMP-2）抗体在未治疗的抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）相关性肾炎患者血清中的水平，分析其与疾病活动度及肾损害严重程度的相关性。 方法    选择33例未治疗ANCA相关性肾炎患者和30例健康对照，间接免疫荧光法和夹心ELISA法检测ANCA，ELISA法检测血清中LAMP-2抗体的水平，分析其与疾病活动度及肾损害的相关性，并观察其中25例ANCA相关性肾炎患者活动期及好转后LAMP-2抗体的动态变化。通过受试者工作特征曲线（ROC曲线），判断未治疗ANCA相关性肾炎患者血清LAMP-2抗体的截取值（cut-off），以此观察其在未治疗ANCA相关性肾炎组的阳性率。 结果    未治疗ANCA相关性肾炎组患者血清中LAMP-2抗体的均值高于缓解期ANCA相关性肾炎组患者和健康对照，差异有统计学意义（均P＜0.01）。疾病缓解期患者与健康对照血清中LAMP-2抗体的水平差异无统计学意义（P＞0.05）。未治疗ANCA相关性肾炎组患者间接免疫荧光镜下表现为不典型ANCA荧光模式患者与镜下表现为核周型（P-ANCA）荧光模式患者血清中LAMP-2抗体的平均值差异有统计学意义（P＜0.05）。相关性分析显示，未治疗ANCA相关性肾炎患者血清中LAMP-2抗体水平分别与ESR、Scr、BUN、24 h尿蛋白量、新月体比例、伯明翰血管炎活动性评分（Birmingham vasculitis activity score，BVAS）呈正相关，与Alb、Hb、Ccr呈负相关。 结论    LAMP-2抗体水平与ANCA相关性肾炎疾病活动及肾损害严重程度有一定相关性，其可能是判断ANCA相关性肾炎病情活动和缓解的一个有效指标。  

目的    探讨6分钟步行试验（6-minute walk test，6MWT）在腹膜透析（腹透）患者中的应用及其对腹透患者预后的预测作用。 方法    入选2010年5月1日至2011年4月30日在本院腹透中心规律随访、病情稳定、能耐受6MWT的患者。入选患者均行6MWT，记录6分钟步行距离（6MWD）。按6MWD的中位数值将患者分成高6MWD组和低6MWD组。同时检测患者临床生化指标及检查心脏彩色超声波改变。前瞻性随访所有患者，终点事件为患者死亡、退出腹透或研究终止。logistic回归法分析6MWD的影响因素；多因素Cox风险比例模型法分析6MWD与患者全因死亡的关系。 结果    共145例患者入选本研究。与高6MWD组相比，低6MWD组患者年龄较大；收缩压、舒张压、左室射血分数（LVEF）、蛋白质分解率均较低（均P＜0.01）。高敏C反应蛋白（hs-CRP）、低密度脂蛋白较高（均P＜0.05）。logistic回归分析结果显示高龄（OR＝1.040，P＝0.018）、低舒张压（OR＝0.948，P＝0.007）、低LVEF（OR＝0.927，P＝0.042）是影响腹透患者6MWD降低的独立危险因素。至研究终点，高6MWD组有6例（8.3%）患者死亡，低6MWD组15例（20.5%）死亡，低6MWD组患者的1年存活率明显低于高6MWD组患者（Log-rank＝4.983，P＝0.026）。心血管并发症[95%CI（1.098～8.952），P＝0.033]，6MWD[95%CI（0.104～0.964），P＝0.043]是影响腹透患者全因死亡的独立危险因素。低6MWD组患者技术存活率明显低于高6MWD组（Log-rank＝4.838，P＝0.028）。两组患者无腹膜炎生存时间的差异无统计学意义，但低6MWD组腹膜炎患者转血透的比例明显高于高6MWD组患者（25.0%比4.2%，P＝0.013）。 结论    年龄、舒张压以及左室功能是腹透患者6MWD的独立影响因素，6MWT操作简单、安全，可作为预测腹透患者预后的一项指标。

目的    探讨维持性血液透析（MHD）患者外周血胱抑素C（Cys-C）及氨基末端脑利钠肽前体（NT-proBNP）水平与心血管（CV）事件发生的相关关系，以期寻找一种有效的预测心血管疾病（CVD）的生物学标志物。 方法    从3个血液净化中心的452例MHD患者中筛选出无冠心病、心力衰竭、心律失常病史，血甲状旁腺激素、血红蛋白、血脂等指标正常的患者126例，采用血液透析、血液透析加滤过及血液灌流等3种透析方式，治疗前及治疗期间每3个月检测透析前血Cys-C、NT-proBNP、血磷、血全段甲状旁腺素（iPTH）、血红蛋白、心电图；每6个月行超声心动检查，观察时间24个月，随访3年，记录患者的心血管事件发生情况及检查结果。应用多因素logistic回归分析上述各指标与CV事件发生的相关性。血Cys-C、NT-proBNP预测效能用受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）评价。 结果    126例患者试验及随访期间发生CV事件18例次，其中心力衰竭8例次，心肌梗死4例次，心律失常6例次。发生CV事件患者血Cys-C中位数[M（1/4，3/4）]为8.59（9.74，7.10） mg/L，NT-proBNP中位数为7 739（9 887，      6 736） ng/L。多因素非条件logistic回归分析结果显示，Cys-C、NT-proBNP、iPTH、透析低血压、透析期间体质量增长是CV事件发生的独立危险因素。血Cys-C和NT-proBNP水平在预测MHD患者CVD发生的AUC分别为0.64（95%CI 0.53～0.71，P＜0.05）和0.79（95%CI 0.72～0.89，P＜0.01）。以Cys-C中位数8.59 mg/L、NT-proBNP中位数7 739 ng/L作为临界值，其预测CV事件的灵敏度为84.3%，特异度为92.7%。 结论    血清Cys-C、NT-proBNP是预测血液透析患者心血管事件发生的有效生物学标志物。

目的    观察尿毒症大鼠腹膜组织tristetraprolin（TTP）与血管内皮生长因子（VEGF）家族表达及淋巴管新生情况，探讨TTP与淋巴管新生是否参与了超滤衰竭（UFF）的发生。 方法    选取清洁级健康SD大鼠40只（180～200 g），采用随机区组法分为5组：正常对照组、假手术组、尿毒症组、PD2周组和PD4周组，每组8只。应用5/6大鼠肾脏切除法构建尿毒症大鼠模型，并在此基础上建立腹膜透析大鼠模型。PD组行规律腹膜透析2周或4周。正常对照组、PD2周组、PD4周组SD大鼠于处死前，行腹膜平衡实验（PET），计算葡萄糖转运量和超滤量。RT-PCR法检测腹膜组织VEGF、VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、TTP mRNA的表达，免疫组化或Western印迹法检测腹膜中VEGF、VEGF-C、TTP蛋白的表达，CD31、LYVE-1分别标记腹膜组织新生血管密度（MVD）和淋巴管密度（LVD）。 结果    （1）与正常对照组相比，PD2周组和PD4周组葡萄糖转运量均增加（P＜0.05），超滤量均减少（P＜0.05），且PD4周组较PD2周组更显著（P＜0.05）。（2）与正常对照组相比，尿毒症组和PD4周组大鼠腹膜的CD31、LYVE-1蛋白表达均增加（P＜0.05），且腹膜的MVD和LVD亦增加（P＜0.05）；与尿毒症组相比，PD4周组更显著（P＜0.05）。（3）与正常对照组相比，尿毒症组大鼠VEGF、VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D mRNA表达均增加（P＜0.05），且PD4周组的表达量显著高于尿毒症组（P＜0.05）。其中PD4周组的VEGF和VEGF-C mRNA和蛋白表达均高于PD2周组（P＜0.05）。（4）与正常对照组相比，尿毒症组和PD2周组TTP蛋白表达减少（P＜0.05），而与尿毒症组和PD2周组比较，PD4周组大鼠TTP蛋白表达显著减少（P＜0.05）。 结论    在机体内尿毒症和高糖腹透液环境下TTP表达异常，使其对VEGF家族表达失调控，且具有腹透时间依赖性，进而促进超滤衰竭的发生。高糖腹透液导致血管和淋巴管的新生，二者均参与超滤衰竭的发生。

目的 探讨白藜芦醇（RSV）对自发性高血压大鼠肾损害的保护作用及对炎性因子白细胞介素6（IL-6）、胞间黏附分子1（ICAM-1）的影响。 方法    雄性8周龄自发性高血压大鼠（SHR）按随机数字表法分为2组：模型组（SHR组，n＝6）和RSV干预组（RSV组，n＝6），另取同龄雄性正常血压（Wistar-Kyoto）大鼠作为对照组（WKY组，n＝6）。RSV组每天予RSV（20 mg/kg） 灌胃持续20周，SHR组与WKY组同时予等量生理盐水灌胃。代谢笼收集8 h尿液检测尿微量白蛋白（mALB）和尿β2微球蛋白（β2-MG），收集血和肾组织标本检测血肌酐、尿素氮以及肾脏组织病理改变，免疫组化法观察各组大鼠肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原、IL-6、ICAM-1变化；实时定量PCR及Western印迹法检测肾组织IL -6、ICAM-1 mRNA和蛋白表达。结果 与WKY组相比，SHR组尿mALB和尿β2-MG水平显著增高（P＜0.05），RSV干预可显著减少尿mALB和β2-MG排泄（P＜0.05）。免疫组化结果显示，SHR组大鼠肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原、IL-6、ICAM-1的表达较WKY组增加，RSV干预能显著减轻上述改变。同时SHR组大鼠肾组织IL-6、ICAM-1 mRNA和蛋白表达较WKY组显著升高（P＜0.05），RSV干预可显著降低IL-6、ICAM-1的表达（P＜0.05）。 结论    RSV可减轻自发性高血压大鼠尿mALB、尿β2-MG水平，改善肾脏纤维化等指标，其作用机制可能与抑制IL-6、ICAM-1的表达有关，提示炎性反应可能是高血压肾损害潜在的干预靶点。

目的    观察乙酰肝素酶对脓毒症肾小球内皮细胞糖萼的影响，并探讨其预防措施。 方法    C57BL/6小鼠给予脂多糖（LPS）或肿瘤坏死因子α（TNF-α）腹腔注射，1 h后处死，镧示踪后透射电镜观察肾小球内皮细胞糖萼变化，Western印迹检测肾皮质的乙酰肝素酶蛋白表达；人肾小球内皮细胞用TNF-α作用1 h，Western印迹检测乙酰肝素酶的活化蛋白变化。小鼠注射LPS同时给予肝素钠和肝素酶Ⅲ，电镜观察肾小球内皮细胞糖萼的变化；留取小鼠24 h尿液，检测各组尿白蛋白和尿肌酐，计算尿白蛋白-肌酐比值，进行比较。 结果    镧示踪透射电镜显示， LPS组和TNF-α组肾小球内皮细胞糖萼均降解，而足细胞糖萼完整。小鼠注射LPS后1 h开始，肾皮质乙酰肝素酶蛋白表达显著增高（P＜0.01）。TNF-α刺激人肾小球内皮细胞后乙酰肝素酶活化增加（P＜0.05）。小鼠注射LPS同时给予肝素钠抑制乙酰肝素酶，肾小球内皮细胞糖萼完整，尿白蛋白-肌酐比值显著低于LPS组（P＜0.05）；同时给予肝素酶Ⅲ使肾小球内皮细胞糖萼降解，尿蛋白-肌酐比值无改善，显著高于对照组（P＜0.01）。 结论    脓毒症初期，TNF-α使肾小球内皮细胞的乙酰肝素酶表达和活化增加，肾小球内皮细胞糖萼降解，发生蛋白尿；抑制乙酰肝素酶能保护肾小球内皮细胞糖萼，减少尿蛋白。

目的    观察富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）对缺氧后人肾小管上皮细胞（HK-2）氧化应激的影响，探讨Cyr61对HK-2 的保护机制。 方法    将HK-2细胞分为5组：空白组、Cyr61处理组、MAPK抑制剂组（Cyr61+PD98059预处理）、p38抑制剂组（Cyr61+SB203580预处理）、PI3K抑制剂组[Cyr61+渥曼青霉素（Wortmannin）预处理]。各组细胞预处理12 h后进行缺氧培养。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测缺氧前后细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率，双氯荧光黄乙酸乙酯（DCFH-DA）染色检测细胞内活性氧簇（ROS）的生成量，比色法检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性，Western印迹法检测细胞磷酸化（p）Akt及细胞核内Nrf2蛋白表达水平。   结果    缺氧培养后空白组HK-2细胞内ROS含量和Nrf2蛋白表达增加，SOD、CAT活性下降，同时细胞存活率下降，凋亡率增高（均P＜0.05）。Cyr61处理组缺氧后存活率、细胞内SOD、CAT活性和p-Akt、Nrf2蛋白显著高于空白组，同时其凋亡率及ROS含量明显低于空白组（均P＜0.05）。与Cyr61处理组相比，缺氧后PI3K抑制剂组HK-2细胞存活率、细胞内SOD、CAT活性和p-Akt、Nrf2蛋白显著下降，凋亡率及ROS含量显著增加（均P＜0.05）；而MAPK抑制剂组和p38抑制剂组HK-2细胞的各项指标同Cyr61处理组相比差异无统计学意义（均P＞0.05）。 结论    Cyr61可通过PI3K途径促进Nrf2表达，增强抗氧化物质SOD、CAT产生，减少ROS生成，在缺氧诱导的HK-2细胞氧化应激损伤中发挥保护作用。