目的 探讨生物学标志物在预测住院期间急性肾损伤（AKI）患者预后中的价值。 方法 前瞻性选取请肾脏科医生会诊的AKI患者103例为对象。在会诊确诊AKI时留取患者的血和尿标本。ELISA法检测尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、白细胞介素（IL）6和IL?18；比色法检测尿N?乙酰?β?D氨基葡萄糖苷酶（NAG）水平。微粒子增强比浊法检测血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）；同时记录患者的基础Scr（bScr）、会诊时的Scr（cScr）和最高Scr（pScr）。随访会诊后28ｄ时的患者预后和肾脏预后。比较存活和死亡患者之间以及肾脏存活和丢失患者之间各标志物的水平，并运用ROC曲线下面积（AUC）评价各标志物预测患者死亡、肾脏丢失以及需行肾替代治疗（RRT）的敏感性与特异性。AKI定义为会诊前48 h内Scr较基础值升高≥50%。 结果 （1）103例住院AKI患者，平均年龄（54.28±19.05）岁，男女比例1.86∶1。（2）会诊后28 d患者病死率为25.2%。死亡和存活患者的bScr、cScr和pScr均相似，但会诊时的尿NGAL水平在死亡患者中显著高于存活患者[147.00（31.59～221.87） mg/L比22.43（6.48～89.77） mg/L，P＝0.001]，而血Cys C、尿IL?6、尿IL?18和尿NAG在两组间差异均无统计学意义。多因素Logistic回归分析显示尿NGAL是预测患者死亡的独立危险因素（OR＝1.011，95%CI 1.004～1.018，P＝0.001），尿NGAL预测患者死亡的AUC为0.723。（3）会诊后28 d患者的肾脏丢失率为20.4%。肾脏存活和丢失患者的bScr、cScr和pScr值均相似，但会诊时肾脏丢失患者的尿NAG、尿IL?6、尿NGAL和尿IL?18水平均显著高于肾脏存活患者。多因素Logisitc回归分析显示尿IL?6是预测肾脏丢失的独立危险因素（OR＝1.056，95%CI 1.009～1.105，P＝0.018），其AUC为0.705。（4）会诊后28 d患者行RRT治疗率为46.6%，行RRT时间距离会诊的中位时间为2.17（0，3） d。行RRT患者的cScr、pScr以及会诊时的血Cys C、尿IL?6和尿NGAL水平均高于未行RRT组（均P＜0.01）。多因素分析显示尿NGAL是预测行RRT的独立危险因素（OR＝1.012，95%CI 1.005～1.019，P＜0.01），其AUC为0.775。 结论 肾科医生会诊时的尿NGAL水平可以较好地预测住院AKI患者的预后，包括患者预后和RRT治疗。会诊时的尿IL?6可能有助于预测住院AKI患者肾脏的预后。然而，这观点还需要进行大样本的研究来进一步证实。
目的 探讨非糖尿病腹膜透析患者糖化血红蛋白（HbA1c）水平与颈动脉内中膜厚度（CIMT）的相关性，明确HbA1c是否为颈动脉硬化的预测因子。 方法 选择非糖尿病腹膜透析的成年患者42例[平均年龄（48.2±12.3）岁，男性21例]，超声检测CIMT，按CIMT厚度分为两组：CIMT正常组（CIMT＜0.9 mm）和CIMT增厚组（CIMT≥0.9 mm）。使用Spearman秩相关和多重线性回归分析CIMT的影响因素。 结果 非糖尿病腹膜透析患者CIMT与年龄、餐后2 h血糖、LDL?C、TG、TC、HbA1c呈正相关（r＝0.355、0.373、0.416、0.345、0.351、0.456，均P＜0.05），而HbA1c对CIMT的影响最大（β＝0.459）。 结论 在非糖尿病腹膜透析患者中，HbA1c水平与CIMT正相关，HbA1c可能是颈动脉硬化的预测因子。
目的 探讨尿肾脏损伤分子1（KIM-1）、白细胞介素18（IL-18）和胱抑素C（Cys C）对老年钆造影剂肾病（Gd-CIN）的预测价值。 方法 选取2010年12月至2011年12月在中南大学湘雅二医院因核磁共振检查使用钆造影剂的老年患者60例，收集患者造影前和造影后第24、48 h的血清和尿标本。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测尿液中KIM-1、IL-18和Cys C水平，全自动生化分析仪检测血肌酐和尿肌酐。 结果 60例静脉注射钆造影剂患者中8例发生Gd-CIN，发生率为13.3％。与造影前基础值比较，造影后24 h Gd-CIN组患者尿KIM-1、IL-18和Cys C水平均明显增高（P＜0.05）；造影后24 h Gd-CIN组尿KIM-1、IL-18和Cys C水平及造影后48 h尿IL-18水平均显著高于非Gd-CIN组（均P＜0.05）；造影后48 h Gd-CIN组尿KIM-1、Cys C水平与非Gd-CIN组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。多因素Logistic回归分析显示造影后24 h尿KIM-1、IL-18水平是造影后Gd-CIN发生的独立预测指标（OR＝1.612、1.009，均P＜0.05）；尿KIM-1、IL-18和Cys C水平较Scr升高提前。 结论 尿KIM-1、IL-18和Cys C水平检测对核磁共振检查老年患者早期诊断Gd-CIN有重要预警价值。
目的 评价基于血清胱抑素C（Cys C）的残余肾功能（RRF）评估方程（Yang方程和Hoek方程）在持续性非卧床腹膜透析（CAPD）患者中的适用性。 方法 搜集上海同济大学附属同济医院肾内科50例CAPD患者的数据，根据尿量＞100 ml/d或≤100 ml/d，分为有尿组（42例）和无尿组（8例），比较2组间血清Cys C水平。以残肾肌酐清除率和残肾尿素清除率的算术平均值作为测定残余肾功能（mRRF）的金标准，以Yang方程、Hoek方程和简化MDRD方程计算有尿组42例患者的估算残余肾功能 （eRRF）。比较不同方程间的估测偏差、精确度和准确性。 结果 （1）无尿组血清Cys C水平显著高于有尿组，差异有统计学意义[（7.73±1.13） mg/L比（6.46±1.15） mg/L，t＝2.39，P＝0.02]。（2）Yang方程、Hoek方程和简化MDRD方程估测的RRF均与mRRF呈正相关（r＝0.56、0.56和0.39，均P＜0.05）。（3）Yang方程、Hoek方程和简化MDRD方程估测RRF时偏差均数分别为0.10、-0.73和3.15 ml•min-1•（1.73 m2）-1，以Yang方程最小，Hoek方程次之，简化MDRD方程最大。（4）Yang方程和Hoek方程估测RRF的精确度相当[6.2 ml•min-1•（1.73 m2）-1比6.1 ml•min-1•（1.73 m2）-1]，而简化MDRD方程最差[8.4 ml•min-1•（1.73 m2）-1]。（5）Yang方程、Hoek方程和简化MDRD方程估测RRF时的50%准确性分别为59.5%、54.8%和23.8%，前2者显著高于后者（均P＜0.01）。 结论 基于Cys C的eRRF评估方程（Yang方程和Hoek方程）估测RRF的偏差、精确度和准确性均较简化MDRD方程有改善。两者相比，Yang方程估测RRF的偏差更小，而Hoek方程表达式更简单。因此，临床实践中可根据不同需要选择合适的RRF评估方程。
目的 探讨高糖刺激内皮细胞表型改变后是否诱导其分化为多能干细胞，再进一步分化成软骨细胞，从而介导血管钙化的形成。 方法 人主动脉内皮细胞（HAEC）被随机分成3组：正常对照组（NG，5.5 mmol/L葡萄糖）、高糖组（HG，30 mmol/L葡萄糖）和甘露醇对照组（5.5 mmol/L葡萄糖＋24.5 mmol/L甘露醇），培养48 h。激光共聚焦显微镜观察CD31和成纤维细胞特异性蛋白1（FSP1）在人主动脉内皮细胞的表达。实时定量PCR和Western印迹法检测细胞CD31及FSP1基因和蛋白的表达。再使用软骨细胞培养基对高糖刺激的人主动脉内皮细胞进行1周诱导分化，实时定量PCR和Western印迹法检测细胞CD10和CD44基因和蛋白的表达，免疫荧光法检测间充质干细胞标志物CD44和STRO-1的表达；阿辛蓝染色和Western印迹法鉴定软骨细胞和其标志物SOX9的表达。电镜观察细胞形态变化。 结果 高糖干预后，CD31的蛋白和mRNA表达水平下降（P＜0.01），FSP1的蛋白和mRNA表达水平增加（P＜0.01）；激光共聚焦显微镜可见CD31和FSP1表达重叠，一些细胞呈纺锤样改变并CD31染色阴性。经软骨细胞培养基诱导分化1周后，多能干细胞标志物CD44、CD10的蛋白和mRNA表达水平显著高于正常对照组（P＜0.01）；共聚焦显微镜提示，间充质干细胞标志物STRO-1表达亦显著高于正常对照组；高糖组细胞SOX9蛋白和基因表达水平显著高于正常对照组（P＜0.01）；细胞阿辛蓝和茜素红染色阳性；电镜显示高糖使细胞粗面内质网和微丝明显增多。 结论 高糖可诱导HAEC发生内皮-间充质转分化，并获得多能干细胞表型，在合适的诱导环境下分化为软骨细胞，参与糖尿病肾病心血管钙化的发生和发展。
目的 探讨内质网应激在高糖诱导单核细胞活化中的作用。 方法 采用高糖刺激培养的单核细胞株（THP-1）。RT-PCR和Westen印迹法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、磷酸化c-Jun氨基末端蛋白激酶（p-JNK）等内质网应激反应指标变化以及分子伴侣甜菜碱干预后的改善效果。MTT法检测细胞增殖，Transwell小室法检测单核细胞的趋化能力。免疫荧光法检测单核细胞亚型。 结果 与正常对照组相比，GRP78 mRNA和蛋白表达升高（P＜0.05）；p-JNK蛋白表达水平增加（P＜0.05）；单核细胞增殖活性和趋化能力增强，向M1亚型分化增多（P＜0.05）。分子伴侣甜菜碱可抑制高糖引起的单核细胞内质网应激反应、增殖活性和趋化能力，促使单核细胞向M2亚型分化。 结论 高糖通过刺激内质网应激而诱导单核细胞活化，甜菜碱可逆转高糖对单核细胞的激活作用。
目的 探讨在高糖作用下泛素蛋白酶体途径（UPP）对大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达的影响，并用蛋白酶体抑制剂MG132为阻断剂，探讨泛素蛋白酶体途径在腹膜纤维化中的作用。 方法 胰蛋白酶消化法原代和传代培养RPMC，经鉴定后第2代用于实验。随机分为对照组、不同浓度葡萄糖组（1.5%、2.5%、4.25%葡萄糖作用24 h）、高糖作用不同时间组（2.5%葡萄糖分别作用于 RPMC 0、12、24、48 h）和MG132组（0.5、1、2 μmol/L MG132预孵30 min后加2.5%葡萄糖作用24 h）。Western 印迹法检测ERK1/2蛋白的表达。ELISA法检测细胞培养上清液中CTGF蛋白的含量。 结果 与对照组相比，高糖可刺激RPMC 磷酸化（p）ERK1/2蛋白表达上调，24 h时达高峰（P＜0.01），48 h时下调，但仍高于正常组（P＜0.01）。高糖诱导RPMC CTGF蛋白表达增高，且呈时间、剂量依赖性（P＜0.05）。与高糖组相比，MG132能明显降低高糖所致的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达（P＜0.05）。 结论 MG132可降低由葡萄糖诱导的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达；泛素蛋白酶体途径参与了由高糖诱导的腹膜纤维化，阻断泛素蛋白酶体途径有利于防治腹膜纤维化。
目的 探讨缺血预适应（IPC）对肾脏缺血再灌注损伤（IR）后内源性内皮祖细胞（EPC）归巢动力学的影响及意义。 方法 60只雄性SD大鼠切除右肾1周后被随机分为3组：（1）对照组：仅游离左肾动脉；（2）缺血再灌注损伤组（IR组）：夹闭左肾动脉40 min后恢复灌注；（3）缺血预适应组（IPC组）：夹闭肾蒂前给予15 min缺血、10 min再灌注预处理，余同IR组。术后3、12、24、72 h留取大鼠静脉血、肾、脾、肺脏。血生化检测及组织病理学检查评估各组大鼠术后肾损伤程度；流式细胞术观察IPC对EPC归巢动力学影响。 结果 IPC组血肌酐、尿素氮及肾小管损伤评分均低于同时间点IR组。与对照组或IR组相比，IPC组大鼠外周血EPC数量在术后12、24 h升高（P＜0.05）；与同时间点IR组比较，IPC组肾组织EPC数量在12、24 h增高[（11.36±0.66）%比（6.37±0.69）%，（6.31±0.70）%比（4.40±0.60）%，均P＜0.05]；IPC组术后12 h肺脏EPC数量高于IR组[（2.95±0.66）%比（1.78±0.59）%，P＜0.05]及对照组[（2.95±0.66）%比（1.66±0.61）%，P＜0.05]。IPC组术后72 h脾脏EPC数量高于同时间点IR组和对照组[（0.55±0.06）%比（0.34±0.07）%、（0.31±0.06）%，均P＜0.05]。 结论 IPC可动员内源性EPC随血流归巢至损伤肾脏。EPC尚可在肺脏、脾脏中聚集。
目的 观察Goto-Kakizaki（GK）大鼠2型非肥胖糖尿病肾病（DKD）模型骨骼肌蛋白消耗情况，探讨低蛋白联合α酮酸对其的作用。 方法 雄性GK大鼠45只，24周龄开始给予饮食干预，随机分为正常蛋白组（22%酪蛋白，NPD组）、低蛋白组（6%酪蛋白，LPD组）和低蛋白联合α酮酸组（5%酪蛋白＋1% α酮酸，Keto组）；另设性别、周龄相同的Wistar大鼠15只为对照组（CTL组），予以正常蛋白饮食（22%酪蛋白）。观察大鼠生存状况，每周用电子秤称重，同时检测各组第24、32、40、48周龄大鼠尿总蛋白及尿白蛋白，血清中葡萄糖、Scr、BUN、白蛋白、胆固醇、三酰甘油等变化。组织病理学观察48周龄大鼠比目鱼肌形态，并计算肌纤维横截面积。用定量PCR和Western印迹法检测比目鱼肌肌萎缩关键基因atrogin-1、MuRF-1和骨骼肌增殖分化关键基因MyoD、myogenin表达水平。 结果 与CTL组相比，NPD、LPD及Keto组体质量显著下降[（317.90±13.81）、（330.38±11.96）、（390.44±12.25） g比（429.43±16.85） g，均P＜0.05]；尿白蛋白排泄增多[（14.36±5.52）、（8.12±4.61）、（5.58±3.50） mg/24 h比（0.61±0.16） mg/24 h，均P＜0.05]；Scr和BUN水平也显著增高[Scr：（81.50±7.88）、（66.32±8.36）、（63.44±8.21） μmol/L比（24.43±6.15） μmol/L；BUN：（7.53±1.05）、（ 5.63±1.40）、（5.54±0.97） mmol/L比（2.98±0.62） mmol/L；均P＜0.05]。与CTL组相比，NPD、LPD及Keto组比目鱼肌变细，肌纤维横截面积减少（均P＜0.05）；肌肉组织atrogin-1和MuRF-1表达水平约为CTL组的2倍（均P＜0.05），而MyoD和myogenin表达水平均有不同程度下降（均P＜0.05）。与NPD、LPD组相比，Keto组GK大鼠40周龄时体质量显著增加[（381.62±15.82） g比（331.50±17.58）、（326.60±13.43） g，均P＜0.05]；Scr、BUN及尿蛋白水平均显著降低（均P＜0.05）；比目鱼肌湿重和横截面积轻度增加；atrogin-1、MuRF-1蛋白表达水平显著下降；myogenin、MyoD蛋白表达水平高于CTL组（均P＜0.05）。LPD组和NPD组组间差异无统计学意义。 结论 DKD可引起骨骼肌蛋白质消耗；肌萎缩关键基因表达升高；骨骼肌卫星细胞的增殖分化功能障碍。低蛋白联合α酮酸饮食则可改善DKD肌肉蛋白消耗状态，减轻骨骼肌萎缩程度。
目的 探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）1型受体拮抗剂（ARB）对2型糖尿病肾病（DN）大鼠肾小球内12-脂氧合酶（12-LO）活性及P钙黏蛋白（P-cadherin）表达的影响。 方法 用10-7 mol/L AngⅡ处理足细胞24 h。采用皮下包埋的微型渗透泵给雄性SD大鼠分别持续恒速注入12-LO 代谢产物12羟二十烷四烯酸[12（S）-HETE，1 mg•kg-1•d-1]和AngⅡ（400 ng•kg-1•min-1）1周和2周。使用高脂饮食结合小剂量链脲菌素（STZ）诱导2型糖尿病模型，大鼠模型成功后随机分为2组：DN组和ARB（5 mg•kg-1•d-1洛沙坦）组。以规律正常饮食大鼠作为对照组。6周后处死大鼠，收集尿、血液，提取肾脏，用系列过筛方法分离肾小球。采用ELISA、RT-PCR和Western印迹法分别检测相关指标。 结果 AngⅡ的直接刺激可以诱导足细胞及肾小球内12（S）-HETE含量增高（P＜0.01）。12（S）-HETE刺激使大鼠肾小球内AngⅡ含量增高（P＜0.01）。与对照组比较，DN组血糖（P＜0.01）、肾质量/体质量 （P＜0.01）和24 h尿白蛋白明显增高（P＜0.01），但洛沙坦治疗后尿白蛋白（P＜0.05）、肾质量/体质量（P＜0.05）明显低于DN组。与对照组比较，DN组肾小球内12（S）-HETE含量明显增高（P＜0.01）, P-cadherin mRNA和蛋白表达明显降低（P＜0.01），但洛沙坦治疗后肾小球内12（S）-HETE含量明显低于DN组（P＜0.05），P-cadherin mRNA和蛋白表达明显高于DN组（P＜0.05）。 结论 AngⅡ通过激活12-LO诱导肾小球内P-cadherin的表达下调。ARB通过抑制12-LO活性而上调DN肾小球内 P-cadherin表达，从而延缓DN的进展。
