目的 探讨系统性硬化(SSc)急性肾损伤(AKI)患者的临床和病理特点。 方法 回顾性分析11 例SSc急性肾损伤患者的临床资料，比较抗中性白细胞胞质抗体(ANCA)阳性和阴性SSc患者的肾脏损伤情况。 结果 11 例SSc急性肾损伤患者中，ANCA阴性9 例，6 例临床表现为硬皮病肾危象(SRC)，其中4 例肾活检示小叶间动脉和入球小动脉内皮细胞增生、肿胀，内膜黏液性水肿，内弹力纤维断裂，“洋葱皮样”改变和肾小球弥漫性缺血；无恶性高血压表现2 例；急性肾小管坏死1 例。MPO-ANCA阳性2 例，无恶性高血压表现，1 例肾活检示新月体肾炎。所有病例均予糖皮质激素治疗，8 例患者接受环磷酰胺（CTX）治疗，9 例患者接受血液透析治疗。SRC的6 例患者都接受了大剂量的ACEI和（或）ARB治疗，其中4 例于6个月内死亡，余ANCA阳性和阴性的患者中也各有1 例死亡。 结论 SSc患者AKI的临床表现多样，SRC、ANCA相关性小血管炎都可能导致SSc患者急性肾损伤发生，两者在临床、肾脏病理及治疗方面有明显的不同，但预后都不良。 大剂量糖皮质激素有诱发SRC的可能，建议泼尼松用量<15 mg/d。

目的 探讨黄芪水提物(ARE)对健康人的利尿利钠作用及其机制。 方法 采用双盲交叉试验。 12名健康男性志愿者口服生理盐水（10 ml/kg）后随机分为ARE组和安慰剂组, 2周洗脱期后再进行试验。 结果 与安慰剂组相比，ARE组尿钠排泄量(U_NaV)在1.5 h和2 h分别增加73%和43%, 2 h时达高峰[(0.30±0.05) 比(0.21±0.02) mmol/min, P < 0.05]，4 h时作用基本消失。尿钠排泄分数(FE_Na)和尿氯排泄量(U_ClV)也显著增加，均在2 h达高峰, 而尿量、尿钾及尿肌酐排泄量在服药4 h内均无增加，12 h和24 h尿量及尿电解质排泄量也无改变。口服ARE后血浆心钠素浓度(pANP)、尿环磷酸鸟苷排泄量(U_cGMPV) 及U_cGMPV/pANP比值均在2 h显著增加(P < 0.05)。U_NaV与血浆pANP、U_cGMPV及U_cGMPV/pANP比值正相关(P均< 0.05), 而与Ccr无相关 (r = 0.153, P > 0.05)。 结论 ARE能增加健康人尿钠排泄，其机制与ARE促进ANP产生以及增加ANP肾脏活性有关。

目的 研究CKDⅤ期患者血中高级蛋白氧化产物(AOPP)水平及其与动脉钙化的关系，并探讨AOPP可否诱导动脉平滑肌细胞向成骨细胞分化。 方法 50例CKDⅤ期患者为尿毒症组，10例肾功能正常的胸腺瘤患者作为对照组。测定血AOPP、钙、磷、甲状旁腺激素(iPTH)水平，同时分别取桡动脉和同级别的胸廓内动脉做组织学检查。体外用次氯酸处理的人血清白蛋白(AOPP-HSA)作用于主动脉平滑肌细胞（HASMC），以单纯人血清白蛋白(HSA)培养基和常规培养基作为对照，RT-PCR法检测核结合因子α-1(CBFα-1)及骨桥蛋白(OPN)水平。 结果 CKDⅤ期患者血浆AOPP水平明显高于对照组[(90.22±55.88) μmol/L 比 (35.79±4.31) μmol/L, P < 0.01]。50例桡动脉标本中44例有OPN沉积于中膜（88％），其中24例有明显的钙化(48％)，对照组无一例有OPN沉积及钙化。Pearson相关分析显示血清AOPP水平与桡动脉内膜中层厚度（IMT）(r ＝ 0.691，P ＜ 0.01）及管壁/管腔比值（r ＝ 0.354，P ＜ 0.05）呈正相关。血管钙化程度与AOPP（r ＝ 0.791，P ＜ 0.01）、血清磷（r ＝ 0.602，P ＜ 0.01）、iPTH水平（r ＝ 0.549，P ＜ 0.05）呈正相关。体外试验显示AOPP-HSA可诱导HASMC表达CBFα-1和OPN，而单纯HSA无此效应。 结论 CKDⅤ期患者普遍存在高AOPP血症和血管钙化，血AOPP水平与血管钙化密切相关。这可能与AOPP直接诱导动脉平滑肌细胞向成骨细胞分化有关。

目的 探讨罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏的保护作用机制。 方法 将大鼠分为正常组、糖尿病组、小剂量罗格列酮组、大剂量罗格列酮组。药物干预4周后，检测各组大鼠的血糖(BS)、三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、肌酐（Scr）水平及尿白蛋白定量（24 h）。随后处死大鼠，测定肾组织中丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）及铜锌超氧化物歧化酶（Cu-Zn SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、核转录因子-κB（NF-κB）的活性。同时留取肾脏组织作PAS染色行病理检查。RT-PCR和免疫组化法检测肾组织中单核细胞化学吸引蛋白质1（MCP-1）mRNA及蛋白质的表达。 结果 与糖尿病组相比，大剂量罗格列酮干预组BS、TC、TG差异无统计学意义；而肾组织MDA含量、MCP-1 mRNA及蛋白质表达、NF-κB活性差异有统计学意义（P ＜ 0.05），SOD、GSH-Px、T-AOC活性显著上升；肾小球面积及体积减小。 结论 大剂量的罗格列酮可显著改善糖尿病大鼠的肾脏损害，其机制可能与其抗氧化，抑制NF-κB活性，降低MCP-1的含量有关。

目的 探讨FK506对糖尿病大鼠早期肾脏肥大的抑制作用及机制。 方法 应用链脲菌素(65 mg/kg)腹腔注射建立大鼠糖尿病模型。每日分别给予FK506 0.5、1.0 mg/kg 灌胃，共4周。观察大鼠肾质量/体质量、尿白蛋白排泄率（AER）、Ccr及肾组织病理形态学变化。应用Western印迹和免疫组化方法检测肾组织钙神经蛋白(calcineurin，CaN)、1αⅣ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达。 结果 FK506 1.0组大鼠相对肾质量明显低于模型组(P < 0.05)。FK506 0.5与1.0组大鼠AER水平与肾小球平均体积明显低于模型组(P < 0.05、0.01)。FK506 1.0组肾小管间质?鄄损伤指数也明显低于模型组(P < 0.01)。Western印迹显示，模型组肾组织CaN蛋白表达较对照组增加2.4倍；FK506 0.5与1.0 组肾组织CaN蛋白表达比模型组下降38.0%与73.2%。模型组肾组织1αⅣ型胶原、α-SMA及TGF?鄄β1蛋白表达明显高于对照组；FK506组肾组织上述蛋白表达明显低于模型组(P < 0.05、0.01)。 结论 FK506对糖尿病大鼠早期肾脏肥大有明显抑制作用，其机制与下调肾组织增高的CaN表达有关。

目的 探讨罗格列酮（RSG）对慢性环孢素肾病（CCN）大鼠模型的肾保护作用。 方法 低盐饮食基础上建立CCN大鼠模型，其中1组模型鼠用RSG同时灌胃。分别在实验开始后第14天和第35天处死动物，检测血浆和肾组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、AngⅡ1型受体(AT1R)、转化生长因子β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、α-SMA和纤连蛋白（FN）的表达。在体外用不同浓度的CsA和RSG孵育NRK细胞。RT-PCR检测肾皮质TGF-β1，Western印迹分析检测FN、AT1R、p-ERK水平。 结果 RSG可改善环孢素A导致的大鼠肌酐清除率的下降[（0.586±0.094）比(1.072±0.105)ml&#8226;min^-1&#8226;kg^-1，P < 0.01]、血浆和肾组织AngⅡ水平增加（P < 0.01）、肾间质单核细胞浸润（P < 0.01）、肾间质纤维化（1.707±0.019 比 2.335±0.022，P < 0.01）、肾组织α-SMA表达增加（P < 0.01）、肾皮质TGF-β1 mRNA水平增加（P < 0.01）、NRK细胞FN、AT1R和p-ERK蛋白水平增加（P < 0.05）。 结论 RSG可能通过减轻炎细胞浸润、影响AngⅡ作用和下调TGF-β1等途径减轻CsA所致的肾组织损伤。

目的 观察高糖和胰岛素对体外培养的肾小球系膜细胞（GMC）葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）的影响以及胰岛素引起GLUT4易位的情况，探讨GLUT4在糖尿病肾病(DN)发生发展机制中的作用。 方法 将体外培养的鼠1097系膜细胞分为8组：对照组、生理浓度胰岛素组（10^-9 mol/L）、低浓度胰岛素组（10^-8 mol/L）、高浓度胰岛素组（10^-6 mol/L）、高糖组（30 mmol/L）、甘露醇组、高糖加高浓度胰岛素组和高糖加生理浓度胰岛素组。RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达；共聚焦显微镜观察各组GLUT4蛋白表达，以及胰岛素引起GMC GLUT4易位的剂量-时间效应。 结果 胰岛素可增加GLUT4的表达，高糖使GLUT4表达明显下降。胰岛素可引起系膜细胞GLUT4易位。低浓度胰岛素组、高浓度胰岛素组细胞GLUT4均在加入胰岛素15 min后达到最大易位，且以后的45 min胞膜上的GLUT4的荧光强度与15 min时差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 不同浓度的胰岛素均可刺激系膜细胞GLUT4易位，且过程是相似的。高糖明显抑制GLUT4在系膜细胞上的表达。胰岛素可部分拮抗高糖导致的GLUT4下调，且呈剂量依赖性。

目的 探讨急性缺血再灌注（IR）损伤对大鼠肾脏的近期和远期作用及其机制。 方法 双侧肾蒂夹闭40 min后再灌注，制作大鼠IR模型。术后4 h、24 h、48 h、72 h、1周、5周和10周收集血样和肾脏标本，动态观察肾脏病理、肾功能和大鼠死亡情况。用透射电镜观察小管上皮细胞的超微结构；原位末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡情况；Masson染色法观察小管间质纤维化程度；Western印迹法测定α?鄄平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达；免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和转化生长因子β1 (TGF-β1)的分布和表达。 结果　 再灌注后IR组的Scr 和BUN水平逐渐升高，48 h达到最高峰。IR组病死率为32% (8/25)，假手术（Sham）组病死率为0 (0/22)。再灌注48 h IR组出现近端肾小管上皮细胞广泛性坏死和少量凋亡；IR组术后5周和10周有轻至中度的小管间质纤维化，术后1周肾脏α-SMA和TGF-β1蛋白表达显著升高，以后两者表达有所下降但仍高于Sham组。 结论 严重的缺血再灌注损伤不仅是早期肾小管大量坏死、肾功能急剧下降和病死率增高的原因，而且可以导致小管间质纤维化，影响肾脏的远期预后。TGF-β1过表达和肌成纤维细胞增多可能介导了纤维化病变。

目的 建立单核细胞化学吸引蛋白质1（MCP-1） 小分子干扰RNA（siRNA）人肾小管上皮细胞株，并检测MCP-1 siRNA对人肾小管上皮细胞（HKC）MCP-1基因的抑制效应。 方法 针对人MCP-1 mRNA 67、116、142位点设计并合成3对MCP-1 siRNA序列。构建MCP-1特异性siRNA真核表达载体，以脂质体法瞬时转染至HKC。转染24 h后分别应用实时定量RT-PCR及Western印迹技术检测HKC内MCP-1 mRNA、蛋白表达，筛选出抑制效率最高的MCP-1 siRNA。以筛选出的MCP-1 siRNA序列构建慢病毒穿梭质粒。使用慢病毒穿梭质粒进行慢病毒颗粒的包装和生产，得到病毒液并确定其滴度。以病毒液感染HKC，筛选MCP-1 siRNA人肾小管上皮细胞株，并应用实时定量RT-PCR及Western印迹技术检测HKC内MCP-1 mRNA、蛋白表达。 结果 成功建立MCP-1特异性siRNA人肾小管上皮细胞株。MCP-1 siRNA稳定转染能下调人肾小管上皮细胞MCP-1 mRNA (68.49±6.38)%、蛋白(72.97±6.13)%，与对照组比较差异有统计学意义(P < 0.01)。 结论 MCP-1特异性siRNA能高效抑制HKC内MCP-1基因表达。MCP-1 siRNA人肾小管上皮细胞株的建立为MCP-1基因功能及肾间质纤维化防治研究提供实验材料和依据。

目的 研究pcDU6载体质粒介导的转化生长因子β1（TGF-β1）短发夹RNA（shRNA）对人血清白蛋白（HSA）致人肾近曲小管上皮细胞(HK2细胞)增殖，TGF-β1、结缔组织生长因子（CTGF）和纤连蛋白（FN）表达的影响，并探讨有关机制。 方法 构建TGF-β1 shRNA的pcDU6载体质粒，体外培养HK2细胞株。采用脂质体转染将表达TGF-β1 shRNA的pcDU6质粒载体(pcDU6-A1-A2和pcDU6-B1-B2)分别导入实验组细胞。用HSA（5 g/L）刺激HK2细胞12 h或24 h。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定细胞增殖水平。RT-PCR半定量分析HK2细胞中TGF-β1、CTGF和FN mRNA的表达水平；双抗夹心酶联免疫吸附法检测HK2细胞培养液中TGF-β1及FN蛋白质水平。 结果 HK2细胞在HSA刺激下，其TGF-β1、CTGF及FN mRNA的表达明显上调，培养液中TGF-β1和FN的蛋白质含量亦明显升高 (P < 0.05)。与pcDU6空载体组比较，pcDU6载体质粒介导的TGF-β1 shRNA干扰组TGF-β1、CTGF及FN mRNA的表达明显下调（P < 0.05）。TGF-β1 shRNA转染HK2细胞后12 h或24 h，细胞培养液中TGF-β1和FN蛋白质含量明显下降，HK2细胞增殖被部分抑制（P < 0.05）。在细胞增殖、TGF-β1、CTGF及FN基因表达方面，TGF-β1 shRNA干扰组组间比较，以及pcDU6空载体转染组与HSA刺激组比较，差异均无统计学意义。 结论 pcDU6载体质粒介导的TGF-β1 shRNA能够明显抑制HSA刺激下HK2细胞增殖、TGF-β1、CTGF和FN基因的表达。HSA刺激HK2细胞增殖及CTGF和FN基因的过表达可能通过TGF-β1介导。