目的 研究肾小管酸中毒（RTA）一家系的遗传方式和临床特征及分析致病基因SLC4A1突变情况。 方法 通过家系调查和检测肾小管酸化功能，研究分析遗传特点和肾小管缺陷的定位。通过直接测序法分析SLC4A1基因。100例健康正常人作为对照。 结果 该家系共有6例患者确诊为远端肾小管酸中毒（dRTA），6例均有严重的临床表型（发育障碍、肾脏钙质沉着和肾功能不全）；遗传特点符合常染色体显性遗传。SLC4A1基因分析发现位于20号外显子的一个新突变位点（c.2713dupG，band 3 Qingdao），该突变导致第905位密码子起始的移码突变（p.Asp905Glyfs15）。 结论 常染色体显性遗传性dRTA可表现严重的临床表型。1个新的SLC4A1突变位点被确定与显性遗传性dRTA有关。这是国内首次对遗传性RTA的报道。

目的 对1个家族性局灶节段性肾小球硬化（FFSGS）家系的临床表型进行连锁分析，并对国内外已知的4个基因进行排除性定位。 方法 调查该家系成员的临床资料。应用两点连锁分析方法，在已知的FFSGS遗传的相关基因WT1、TRPC6、CD2AP、NPHS2所在染色体区域，选取9个微卫星遗传标记（STR）进行连锁分析。 结果 该FFSGS家系的遗传方式为常染色体显性遗传。19名家系成员中1例已进展至终末期肾病（ESRD）；4例尿检异常成员中2例病理明确诊断为FSGS；Ⅲ9和Ⅲ15患者发病年龄较早，分别为10岁和13岁；第Ⅰ和第Ⅱ代的患者均为25岁以后发病。用D1S196、D1S218、D1S238、11S935、D11S898、D11S908、D11S1986、D6S936、D6S1566等9个STR对该家系进行NPHS2、CD2AP、TRPC6和WT1基因的两点连锁分析，测得各个标记位点在重组率θ=0时，最大优势对数（LOD） 值为0.32 (D11S1986)，不支持连锁。 结论 该FFSGS家系遗传方式为常染色体显性遗传。已知基因NPHS2、WT1、TRPC6、CD2AP不是该家系的致病基因。

目的 比较血液透析和腹膜透析患者的生存情况，探讨影响透析患者生存的主要危险因素。 方法 研究对象为2005年1月1日至2008年12月31日期间新进入透析且年龄≥18岁患者，随访至2009年3月31日。应用Kaplan-Meier法、log-rank检验及Cox回归模型分析患者的生存资料。 结果 共460例透析患者入选，其中247例起始采用血透治疗，213例起始采用腹透治疗。两组患者的基线资料，包括开始透析年龄、体质量指数（BMI）、估算肾小球滤过率（eGFR）、平均动脉压、进入透析治疗前心脑血管事件、Charlson并发症指数（CCI）等的差异均无统计学意义。中位随访时间为17.9（0.25，51）个月。意向治疗分析结果中，Kaplan-Meier生存曲线显示血透总体生存率优于腹透（P ＜ 0.05，log-rank检验）；透析1年内两组生存率差异无统计学意义（P = 0.14），而透析1年后腹透患者的生存率显著低于血透患者（P ＜ 0.05）。亚组分析结果显示，≥65岁的非糖尿病肾病血透组生存率显著高于腹透组（P ＜ 0.05）。Cox回归分析显示，经混杂因素调整后，两种透析方式本身对透析生存无明显影响（HR，HD：PD = 0.778，95%CI 0.483~1.254，P = 0.303）；而年龄（HR = 1.051，95%CI 1.030~1.073，P ＜ 0.01）、透前有脑血管意外史（HR = 2.032，95%CI 1.125~3.670，P ＜ 0.05）、透前CCI≥5（HR=2.592，95%CI 1.230~5.465，P ＜ 0.05）、前白蛋白（HR = 0.022，95%CI 0.001~0.768，P ＜ 0.05）为透析患者生存率的主要影响因素。 结论 透析龄≤1年的血透和腹透生存率无显著差异；透析龄>1年的血透患者生存率可能逐渐高于腹透患者。老年非糖尿病患者血透生存率可能高于腹透。年龄、透前脑血管意外史、透前CCI≥5为影响透析生存率的主要危险因素。

目的 评价糖尿病患者血糖水平对肾小球滤过率（GFR）公式估算结果的影响；比较不同血糖水平Cockcroft-Gault（CG）公式和MDRD公式法估算GFR对诊断肾功能不全的差异。 方法 选取1210例糖尿病患者，同步检测99mTc-GFR（iGFR）、Scr和糖化血红蛋白（HbA1c）。运用CG和MDRD公式计算GFR估计值（eGFRCG、 eGFRMDRD）。依据肾脏病透析预后质量指南（K/DOQI）的建议将糖尿病患者分为iGFR正常组589例[NGFR组，iGFR≥90 ml&#8226;min-1&#8226;(1.73 m2)-1]，iGFR轻度下降组[GGFR组，60≤iGFR<90 ml&#8226;min-1&#8226;(1.73 m2)-1]470例，iGFR中度下降组[MGFR组，30≤iGFR<60 ml&#8226;min-1&#8226;(1.73 m2)-1]151例。根据HbA1c的四分位点（7.1%，10.5%）分为4组（<7.1%、7.1%~8.6%、8.7%~10.4%、≥10.5%），其中HbA1c<7.1%者定义为血糖控制较好组，HbA1c≥10.5%定义为血糖控制差组。采用Spearman相关分析、t检验、Bland-Altman分析、受试者工作特征（ROC）曲线等评估方程的偏离度、准确度，以及血糖对估算结果的影响。 结果 eGFRMDRD在各GFR亚组中均高估GFR；eGFRCG在NGFR组中低估GFR，差异有统计学意义。Bland-Altman分析结果显示，血糖控制较差组的eGFRMDRD的偏差高于血糖控制较好组的eGFRMDRD；血糖控制较差组的eGFRMDRD15%和30%准确性低于血糖控制较好组的eGFRMDRD，差异有统计学意义。血糖控制较差组和较好组间eGFRCG偏差及准确性差异均无统计学意义；而eGFRCG的偏差高于eGFRMDRD，差异有统计学意义。血糖控制良好组CG公式和MDRD公式在诊断肾功能不全患者的ROC曲线下面积差异无统计学意义。血糖控制较差组eGFRMDRD ROC曲线下面积显著大于eGFRCG曲线下面积，差异有统计学意义。 结论 糖尿病患者采用MDRD和CG公式法可导致GFR估计差误。MDRD公式的eGFR估计值受到血糖的影响较大，MDRD公式法高估GFR。MDRD公式在血糖控制较差的患者对肾功能不全患者的估算效应要优于CG公式。

目的 探讨脑外伤患者发生急性肾损伤(AKI)的危险因素，并评价甘露醇在其中的作用。 方法 回顾性分析2006年1月至2008年12月间复旦大学华山医院神经外科急救中心收治的脑外伤患者AKI的发生情况，AKI诊断采用RIFLE分期标准。采用Logistic回归分析脑外伤患者发生AKI的危险因素，建立脑外伤患者AKI发生的预测模型，并运用接受者操作特性(ROC)曲线及曲线下面积评价该模型对预测脑外伤患者并发AKI的敏感性和特异性。采用倾向性得分匹配法（PSM）进一步分析甘露醇对脑外伤患者发生AKI的影响。 结果 共入选符合标准的脑外伤患者171例，其中AKI组53例，非AKI组118例。患者平均年龄（45.92±16.50）岁。单因素分析结果显示，年龄、高血压、急诊手术、系统性炎性反应综合征（SIRS）、Glasgow昏迷评分、序贯器官衰竭评估（SOFA）评分、SOFA呼吸评分、SOFA凝血评分、SOFA心血管评分、机械通气天数、红细胞悬液累计输注总量、血浆累计输注总量、呋塞米累计总剂量、托拉塞米累计总剂量、甘露醇累计总剂量是脑外伤患者发生AKI的危险因素。多因素Logistic回归分析显示，SOFA评分（OR=1.516，95%CI 1.222~1.881，P < 0.01）、托拉塞米累计总剂量（OR=0.016，95%CI 1.002~1.031，P = 0.016）、甘露醇累计总剂量（OR=2.687，95%CI 1.062~6.800，P = 0.037）是脑外伤患者发生AKI的独立危险因素。运用ROC曲线及曲线下面积评价由SOFA评分、托拉塞米累计总剂量和甘露醇累计总剂量3个变量组成的多因素Logistic回归模型对脑外伤患者发生AKI预测的敏感性和特异性，结果显示ROC曲线下面积为0.901（P < 0.01），提示该模型对预测脑外伤患者AKI的发生具有良好的敏感性和特异性。倾向性得分匹配法分析结果显示甘露醇总剂量是脑外伤患者发生AKI的独立危险因素。 结论 AKI是脑外伤患者住院期间常见的并发症。SOFA评分、托拉塞米累计总剂量、甘露醇总剂量是脑外伤患者发生AKI的独立危险因素。

目的 分析肾移植长期受者贫血的特征及其影响因素。 方法 以肾移植长期受者258例为研究对象，总结贫血的性质和发生率，分析贫血与红细胞生成素（EPO）、肾小管功能、肾功能、排斥反应、免疫抑制药物及心脑血管并发症的关系。 结果 258例均为首次肾移植受者，贫血的总发生率为41.1％。受者大部分为正细胞正色素性贫血，少部分为小细胞低色素性贫血，极少部分为溶血性贫血。贫血受者中，大部分为EPO缺乏，少部分为EPO抵抗。受者的血红蛋白（Hb）与估算肾小球滤过率（eGFR）、肌酐清除率（Ccr）呈正相关（r = 0.348， P ＜ 0.01；r = 0.351，P ＜ 0.01）；与N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）呈负相关（r = -0.327，P ＜ 0.01）。在Scr正常的情况下，贫血组肾小管病变比非贫血组严重。贫血受者急、慢性排斥反应的发生率显著高于非贫血受者（P ＜ 0.01)。环孢素+硫唑嘌呤+泼尼松方案（CsA+Aza+Pred ）贫血的发生率为69.0％；环孢素+霉酚酸酯+泼尼松方案（CsA+MMF+Pred）贫血的发生率为35.8％；他可莫司+霉酚酸酯+泼尼松方案（FK506+MMF+Pred)贫血的发生率为34.8％；西罗莫司（雷帕霉素）+霉酚酸酯+泼尼松方案 （SRL+MMF+Pred）贫血的发生率为41.7％。骨髓抑制是硫唑嘌呤最常见的不良反应。Hb与硫唑嘌呤的使用时间呈负相关（r = -0.354，P ＜ 0.01)；Hb与霉酚酸酯的剂量（2~3 g/d）及使用时间呈负相关（r = -0.285，P ＜ 0.05；r = -0.372，P ＜ 0.01）；Hb与雷帕霉素的剂量（2~5 mg/d）及使用时间呈负相关（r = -0.278，P ＜ 0.05； r = -0.359，P ＜ 0.01）。贫血受者心脑血管病变发生率显著高于非贫血受者（P ＜ 0.01）。 结论 肾移植长期受者贫血的发生率相当高。贫血不仅与肾功能、肾小管间质病变相关，而且也与EPO、排斥反应、免疫抑制药物相关。贫血是肾移植受者出现心脑血管并发症的高危因素。

目的 探讨维持性血液透析（MHD）患者记忆执行功能。 方法 运用连线测验、Go-No/Go测验、Stroop颜色命名测验等，比较40例MHD患者和40名正常健康人（NC）的认知计划能力及抑制能力。两组平均年龄和受教育程度差异均无统计学意义。 结果 MHD组的连线测验A、B成绩显著差于NC组（t连线A=6.52，P < 0.01；t连线B = 5.27，P < 0.01）。MHD组Go-No/Go测验基线水平显著低于NC组（t = 3.27，P < 0.01）。MHD组的Stroop干扰效应更明显（t = 3.30，P < 0.01）。Stroop色字测验中，NC组表现出显著的Stroop效应、重复分心物促进效应和负启动效应，MHD组只表现Stroop效应。两组的Stroop效应差异有统计学意义（t = 2.41，P < 0.05）。 结论 MHD患者执行功能中的认知计划能力、抑制能力均受损，其执行功能的病理性损伤独立于生理性衰老过程。

目的 以多柔比星慢性肾损害大鼠为对象，探讨纤维细胞及其趋化因子受体7（CCR7）在肾纤维化中的作用。 方法 雄性SD大鼠52只，随机分为对照组（n = 20）、模型组（n = 32）。实验开始第1、2周第1天，模型组重复给予多柔比星（4 mg/kg）尾静脉注射，对照组给予等量生理盐水，首次给药后第4、7、10、13周末取血、尿检测生化指标；并于对照组和模型组分别随机选取5只和8只大鼠处死留取肾组织，通过Masson染色观察肾脏病理变化，使用肾小球硬化指数（GSI）和肾小管间质损伤指数（TII）评估肾脏病变程度；免疫组化检测CD45、Ⅰ型胶原和CCR7表达。 结果 与对照组相比，第7周末模型组血三酰甘油水平（mmol/L）升高（2.57±1.19比0.76±0.11，P ＜ 0.01）、血总胆固醇水平（mmol/L）升高（6.79±1.47比1.29±0.27，P ＜ 0.01），血清白蛋白水平（g/L）降低（21.41±2.11比34.64±0.96，P ＜ 0.01）；24 h尿蛋白排出量（mg）明显增加（568±102比21±6，P ＜ 0.01）；肾小球系膜基质明显增多，肾小管多灶性萎缩和扩张，管腔内可见蛋白管型。GSI及TII随时间延长逐渐升高（P < 0.05）。连续切片观察肾间质出现CD45、Ⅰ型胶原双阳性细胞。CD45和CCR7阳性细胞第7周数量最多，后逐渐减少（P < 0.01）。 结论 纤维细胞可能参与肾纤维化过程，在早期发挥作用，其由外周血迁移到组织可能与 CCR7有关。

目的 探讨氧化应激依赖的表皮生长因子受体（EGFR）活化在醛固酮（ALDO）诱导的磷酸肌醇-3激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）信号通路活化及系膜细胞增殖中的作用。 方法 体外培养人肾小球系膜细胞，应用3H-胸腺嘧啶（3H-TdR）掺入法和细胞计数测定系膜细胞增殖；荧光探针2，7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸检测细胞内活性氧（ROS）的产生；Western印迹法检测EGFR、PI3K、Akt、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和核糖体蛋白p70S6激酶1（p70S6K1）磷酸化。 结果 （1）ALDO可呈时间依赖性和剂量依赖性的方式促进肾小球系膜细胞ROS产生，100 nmol/L ALDO刺激3 min，ROS产生即显著增加，刺激60 min达到高峰；1、10和100 nmol/L ALDO刺激60 min，ROS产生分别是对照组的1.50、1.70和2.14倍。抗氧化剂乙酰半胱氨酸（NAC）能阻断ALDO诱导的系膜细胞增殖。（2）ALDO可呈时间依赖性和剂量依赖性的方式诱导肾小球系膜细胞EGFR磷酸化，100 nmol/L ALDO刺激5 min，EGFR磷酸化显著增强，刺激60 min达到高峰；1、10和100 nmol/L ALDO刺激60 min，EGFR磷酸化分别是对照组的2.29、3.55和5.25倍。NAC和盐皮质激素受体（MR）阻断剂依普利酮能显著抑制ALDO诱导的EGFR磷酸化，而EGFR特异性抑制剂AG1478能完全阻断ALDO诱导的系膜细胞增殖。（3）100 nmol/L ALDO刺激60 min能显著增加PI3K、Akt、mTOR和p70S6K1磷酸化，其增加倍数分别为对照组的4.35、5.38、3.85和3.57倍，应用NAC和AG1478能阻断ALDO诱导的PI3K、Akt、mTOR和p70S6K1磷酸化。（4）PI3K抑制剂LY294002、Akt抑制剂以及mTOR抑制剂雷帕霉素能显著抑制ALDO诱导的系膜细胞增殖，其抑制率达到50%~55%。 结论 ALDO通过氧化应激依赖的EGFR磷酸化促进肾小球系膜细胞PI3K-Akt-mTOR-p70S6K1信号通路活化及细胞增殖。

目的 制备人谷胱甘肽过氧化物酶（Gpx1）、 组织激肽释放酶（Klk1）共转基因小鼠，在此基础上制作肾缺血再灌注损伤小鼠模型。观察转基因小鼠对缺血再灌注损伤的耐受能力。在体研究Gpx1-Klk1转基因对肾缺血再灌注的保护作用。 方法 应用基因工程技术制备pKsp-Gpx1-IRES-Klk1质粒，酶切后回收转基因片段并纯化，通过外源基因受精卵雄原核显微注射法制备Gpx1-Klk1共转基因小鼠。采用丝线悬吊控制法制备转基因小鼠肾缺血再灌注模型。设立C57BL野生型小鼠同法制备的肾缺血再灌注损伤为对照。在肾缺血再灌注实验前后，测定血尿素氮、血肌酐、肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、总一氧化氮合酶（tNOS）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）。留取肾脏组织制备病理切片，观察Gpx1-Klk1转基因小鼠抗肾缺血再灌注损伤的能力。 结果 获得全长为6.585 kb的pKsp-Gpx1-IRES-Klk1重组质粒，并证明了该克隆的正确性。在转基因小鼠制备过程中，共获得525枚注射卵，移植成功率为81.0%，小鼠出生总数109只。经基因组DNA的PCR检测，确认10只为转基因阳性小鼠，阳性率为9.2%。Western印迹法检测证实了阳性转基因小鼠肾脏组织有Gpx1和Klk1蛋白强表达。转基因小鼠（实验组）和野生型小鼠（对照组）肾缺血再灌注损伤模型建立后，实验组血样中尿素氮及肌酐水平显著低于对照组（P < 0.01）；肾脏组织中SOD显著高于对照组 （P < 0.01），MDA显著低于对照组（P < 0.01）；两组肾组织中tNOS较缺血再灌注前均显著升高，且实验组显著高于对照组（P = 0.025），实验组肾组织中iNOS显著低于对照组（P < 0.01）。缺血再灌注后，实验组肾组织间质轻度水肿，肾小管上皮坏死细胞较少，对标本损伤程度采用半定量评分后显示，实验组损伤程度显著轻于对照组（1.58±1.05比3.95±0.80，P < 0.05）。 结论成功制备Gpx1-Klk1转基因小鼠。Gpx1-Klk1过表达对肾缺血再灌注损伤的保护作用。

目的 通过建立生理条件下的盐负荷饮食大鼠模型，观察醛固酮和WNK4在水盐代谢调节中的作用。 方法 将SD大鼠分为5组：高盐组（H，4% NaCl）、正常盐组（N，0.4% NaCl）、低盐组（L，0.07% NaCl）、高盐加醛固酮组（H+A，4% NaCl+1 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1醛固酮）、低盐加螺内酯（L+S，0.07% NaCl+0.1 g&#8226;kg-1&#8226;d-1螺内酯），所有大鼠自由饮水，喂养2周。用放射免疫法检测血浆醛固酮的变化。应用实时定量PCR和Western印迹法检测大鼠肾脏上皮钠通道γ亚基（γENaC）、WNK4的mRNA和蛋白的变化。 结果 H组大鼠血浆醛固酮水平低于N组（P < 0.05），H+A组高于H组（P < 0.05）；L组大鼠血浆醛固酮水平高于N组（P < 0.05），显示SD大鼠造模成功。L组大鼠肾脏γENaC蛋白表达高于N组，但是L+S低于L组；同时H组低于N组，H+A组高于H组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。mRNA变化趋势和蛋白变化趋势一致。H组肾脏WNK4的蛋白表达高于N组，但是H+A组低于H组；同时L组低于N组，L+S组高于L组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。mRNA的变化趋势和蛋白的变化趋势一致。 结论 饮食中的盐可以调节γENaC在肾脏的蛋白表达，醛固酮和WNK4都参与了机体对盐的调节，WNK4受到醛固酮的负调节作用。

目的　建立纯度高、操作简便的大鼠近端肾小管上皮细胞分离纯化方法。 方法 Wistar大鼠无菌取肾前先心脏抽血替代原位肾脏灌注，分离肾皮质，经Ⅰ型胶原酶消化后用45% Percoll分离液制备细胞悬液直接连续密度梯度离心。所得细胞用含10%胎牛血清的DMEM-F12培养基原代培养并传代，根据细胞形态、细胞角蛋白18（CK18）和水通道蛋白1（AQP1）免疫细胞化学染色及碱性磷酸酶化学染色进行鉴定。 结果 此简化方法获得的肾小管细胞中肾小球掺杂明显减少，培养4～5 d后细胞融合长满，呈典型上皮样细胞的鹅卵石状，其CK18、AQP1免疫细胞化学染色及碱性磷酸酶化学染色几乎均呈阳性，证实所培养细胞为近端肾小管上皮细胞。 结论 改良后的分离纯化方法可获得大量高纯度近端肾小管上皮细胞，操作简便。