目的 了解慢性肾小球肾炎（CGN）患者血浆海蟾蜍毒素（MBG）水平及其受体Na+-K+-ATP酶（NKA）在肾组织中的表达情况。 方法 竞争抑制ELISA法测定28例CGN患者和14例健康人血浆MBG浓度。应用免疫荧光共聚焦、免疫组化和图像分析技术检测CGN患者肾组织内NKA的表达部位及表达量。 结果 CGN患者血浆MBG浓度低于健康对照组[（0.579±0.214） nmol/L比（0.715±0.154） nmol/L，P < 0.05]，其中高血压者与血压正常者血浆MBG浓度差异无统计学意义[（0.595±0.231） nmol/L比（0.557±0.197） nmol/L，P > 0.05]。血浆MBG浓度与24 h尿钠排泄量无相关（r = -0.022，P > 0.05）。与正常肾组织比较，CGN患者近端肾小管NKA表达下降，肾小管NKA表达阳性面积百分比明显减少[2.1%（0.5%~6.2%）比 5.6%（3.5%~10.8%），P < 0.01]，且与24 h尿钠排泄量呈正相关（r = 0.551，P < 0.01）。 结论 CGN患者血浆MBG水平及其受体NKA在近端肾小管表达的下降可能参与CGN患者钠代谢调节。

目的 观察透析中心夜间血液透析（INHD）治疗尿毒症患者的疗效和安全性。 方法 32例维持性血液透析（MHD）患者行INHD共6个月，3次/周，7.5 h/次。进入INHD前及开始后1、3、6（或3、6）个月测定透析相关指标，做心脏彩超检查、SF-36问卷调查，记录药物使用情况。 结果 进入INHD后，患者透前血压显著下降（130.3/86.0比139.3/88.6 mm Hg， P < 0.01）；透后血压显著上升（121.1/80.5比115.0/77.8 mm Hg，P < 0.01）；透析中高血压（9.8%比24.0%）及低血压发生率（7.3%比14.9%）均显著减少（均P < 0.01）。INHD 6个月后血磷[（1.37±0.27）比（2.08±0.49） mmol/L，P < 0.01]和iPTH值[（355.4±139.6）比（632.3±750.0） ng/L，P < 0.01]显著下降；血钙水平显著上升[（2.64±0.25）比（2.28±0.37） mmol/L，P < 0.05]。与INHD 1个月相比，INHD 6个月时高密度脂蛋白（HDL）显著升高[（1.27±0.29）比（0.75±0.08） mmol/L]；低密度脂蛋白（LDL）显著下降[（2.04±0.52）比（2.75±0.75） mmol/L，P < 0.05]；尿素下降率（URR）[（79.7±0.1）%比（64.7±4.7）%]和Kt/V（1.40±0.44比0.89±0.25，P < 0.01）显著增加；β2-MG水平显著下降[（17.3±3.9）比（24.6±5.9） mg/L，P < 0.01]；左室质量指数（LVMI）显著下降（99.8±29.0比114.8±72.7，P < 0.05）；SF-36量表生理功能、生理职能和情感职能得分显著升高（均P < 0.01）。INHD 6个月时降压药物使用种类、EPO剂量、活性维生素D3（P < 0.05）及降磷药物剂量（P < 0.01）均显著减少，停用降压药、活性维生素D3及降磷药物患者数显著增加（P < 0.05）。 结论 INHD能改善高血压、贫血、钙磷代谢、脂质代谢紊乱，改善心功能，提高生活质量，不良反应少，具有很好的应用前景。

目的 研究同种异体肾移植术后急性排斥患者肾小球炎的细胞类型及其与管周毛细血管（PTC）C4d沉积的关系。 方法 2006年6月至2009年6月在本中心行同种异体肾移植手术后，肾功能异常且病理证实为急性排斥并发小球炎受者51例的肾活检组织为研究对象。免疫组化方法检测同一活检标本连续切片内T细胞表面标记物CD3、巨噬细胞表面标记物CD68、体液性排斥特异性标记物C4d、细胞毒T淋巴细胞标记物颗粒酶B及调节性T淋巴细胞标记物Foxp3的表达情况。根据PTC有无C4d沉积将受者分为C4d阳性组和C4d阴性组，定量计数小球内阳性细胞数，并计算每个小球的平均细胞数。 结果 C4d阳性与C4d阴性的急性排斥受者小球内浸润的炎细胞数分别为17.79±7.70和8.17±3.80，差异有统计学意义（P < 0.01）。C4d阳性急性排斥受者小球内以巨噬细胞浸润为主，与C4d阴性者差异有统计学意义（13.73±7.03 比2.57±1.22，P < 0.01）。C4d阴性急性排斥受者小球内以T淋巴细胞为主，与C4d阳性者差异有统计学意义（5.60±2.81比4.05±2.60，P = 0.023）。C4d阴性与C4d阳性急性排斥受者小球内T淋巴细胞都以细胞毒细胞为主 （3.37±2.34比4.27±2.41，P = 0.141），而没有调节性T淋巴细胞的浸润。 结论 肾移植术后急性排斥患者小球内炎细胞浸润总数与PTC的C4d沉积有关。C4d阳性患者小球炎细胞数多于C4d阴性患者。C4d阳性患者小球炎细胞以巨噬细胞浸润为主；C4d阴性患者小球炎细胞以T淋巴细胞浸润为主。两组患者小球内T淋巴细胞都以细胞毒细胞为主。

目的 研究慢性肾脏病（CKD）患者骨代谢状况与尿蛋白量的关系。 方法 随机挑选2008年1月至2009年5月在本院肾活检证实为原发性肾小球疾病的CKD患者71例为对象。按尿蛋白量分为3组：A组25例，尿蛋白量<1.0 g/24 h；B组16例，尿蛋白量 （1.0~<3.5） g/24 h；C组30例，尿蛋白量≥3.5 g/24 h。健康体检者58例为健康对照组。常规测定血清白蛋白、24 h尿蛋白量及血清钙、磷、PTH、25羟基维生素D3[25-(OH)D3]、骨钙素（BGP）、I型胶原吡啶交联C终端肽（CTx）及尿钙/肌酐（UCa/Cr）等骨代谢指标。双能X线骨密度仪检测患者骨密度（BMD）。对各因素间进行Pearson相关分析。 结果 与健康对照组比较，A、B、C组CKD患者血钙分别为（2.23±0.08）、（2.13±0.09）、（2.04±0.06）比 （2.37±0.12） mmol/L；血25-（OH）D3分别为（50.19±6.58）、（47.78±6.69）、（42.42±10.85）比（56.34±8.34） nmol/L（均P < 0.05）；而UCa/Cr显著升高，分别为0.25±0.11、0.34±0.13、0.41±0.05比0.14±0.06（均P < 0.05）。B、C组血BGP分别为（18.69±7.35）、（16.13±5.76） μg/L，显著低于健康对照组的（22.88±6.21） μg/L；血CTx分别为（413.59±114.93）、（516.21±314.25） ng/L，显著高于健康对照组的（304.53±234.15） ng/L（均P < 0.05）。A、B两组BMD与健康对照组差异无统计学意义；C组BMD显著低于健康对照组[（1.028±0.090）比（1.090±0.062） g/cm2，P < 0.05]。Pearson相关分析显示，24 h尿蛋白量与血钙、血 25-(OH)D3呈负相关，与UCa/Cr 呈正相关；UCa/Cr与血CTx 呈正相关，与血BGP呈负相关；25-(OH)D3与BGP呈正相关，与CTx呈负相关。 结论 原发性肾小球疾病CKD患者的骨代谢异常主要表现为骨形成降低，骨吸收增加，其变化与蛋白尿程度相关，而大量尿蛋白患者骨代谢显著异常。

目的 利用比较蛋白质组学双向电泳技术研究体系，观察高糖培养下人肾小球系膜细胞（HMC）蛋白表达谱的变化。 方法 人肾小球系膜细胞分为高糖培养组（30 mmol/L）和正常糖组（5 mmol/L），培养48 h后收集细胞，提取总蛋白，以DIGE饱和荧光标记，双向荧光差异凝胶电泳。应用Typhoon多功能成像系统扫描凝胶，DeCyder 2-D差异分析软件进行图像分析，寻找差异表达蛋白质。采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）和蛋白质数据库检索鉴定差异蛋白。 结果 通过DeCyder 2-D差异分析软件，发现正常糖组和高糖培养组之间差异大于1.5倍的蛋白质斑点147个，对其中96个差异蛋白质斑点进行了肽质指纹图分析，鉴定出37种蛋白质。其中磷脂酰乙醇胺结合蛋白 1（PEBP-1）、粒溶素、ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F2仅在高糖组表达。高糖刺激后表达上调的蛋白质有24个，包括嗜酸细胞阳离子蛋白、RGS膜相互作用蛋白16（MIR16）、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶、disks large homolog DLG2、早发性乳腺癌2（BRCA2）、儿茶酚-邻-甲基转移酶等；表达下调的蛋白有5个，包括O-GlcNAc transferase-interacting protein 106 000 isoform 1、proteasome beta 6 subunit precursor、NEFA-interacting nuclear protein NIP30等。 结论 高糖培养下HMC内147种蛋白质的表达发生变化。这些蛋白质广泛参与高糖对HMC的细胞骨架、糖代谢、细胞分裂、基因转录、信号转导、磷酸化、细胞增殖、凋亡等的调节。深入分析这些差异表达蛋白的功能与调控，有望为阐明糖尿病肾病的发病机制提供重要的实验依据。

目的 观察醛固酮（ALD）及其受体拮抗剂螺内酯（SPI）对足细胞活性氧（ROS）产生及凋亡的影响，并探讨其可能机制。 方法 体外培养条件的永生化小鼠足细胞系，分为空白对照组、ALD组、SPI组、ALD+SPI组；用荧光分光光度计检测足细胞内ROS水平；间接免疫荧光检测nephrin表达；流式细胞仪检测足细胞凋亡率；RT-PCR、Western 印迹法检测bax、bcl-2 mRNA及蛋白表达。同时观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对上述效应的阻断作用。 结果 与对照组相比，ALD诱导足细胞ROS产生增多（P < 0.05），该作用可被SPI阻断（P < 0.05）。ALD可诱导足细胞nephrin表达降低及足细胞凋亡（P < 0.05），同时伴有bax mRNA、蛋白表达升高及bcl-2 mRNA、蛋白表达降低（P < 0.05），SPI及NAC可阻断这一变化（P < 0.05）。 结论 ALD通过ROS途径作用于盐皮质激素受体上调促凋亡因子bax表达，下调抑凋亡因子bcl-2表达，进而诱导足细胞凋亡。

目的 阐明次氯酸修饰白蛋白（HOCl-Alb）诱导血管内皮细胞炎性反应的机制。 方法 用体外制备的HOCl-Alb与人脐静脉内皮细胞共同培养；用光泽精增强化学发光法测定NADPH氧化酶活性；用免疫沉淀和Western印迹法测定p47phox磷酸化及p47phox与p22phox结合；用免疫荧光化学染色法观察p47phox膜迁移；分别用RT-PCR和Western印迹法测定细胞间黏附分子1（ICAM-1） mRNA和蛋白表达。为了解NADPH氧化酶在HOCl-Alb上调ICAM-1表达过程中的作用，在HOCl-Alb刺激细胞前，在细胞培养液中预先加入NADPH氧化酶特异性抑制剂夹竹桃麻素（apocynin），观察ICAM-1表达的变化。 结果 HOCl-Alb激活NADPH氧化酶具有剂量和时间依赖性，200 mg/L HOCl-Alb刺激15 min使NADPH氧化酶活性增加的量是牛血清白蛋白组的6.16倍（P ＜ 0.01），并可诱导p47phox磷酸化和膜迁移，及其与p22phox结合。HOCl-Alb上调ICAM-1表达的作用可被夹竹桃麻素抑制，500 μmol/L 夹竹桃麻素对HOCl-Alb诱导的ICAM-1表达的抑制率为68.97%（P ＜ 0.01）。 结论 NADPH氧化酶是HOCl-Alb诱导ICAM-1高表达的重要途径，与血管内皮炎性反应关系密切。

目的 探讨慢性肾脏病（CKD）进程中低氧诱导因子（HIF）的肾内表达部位和动态表达变化。 方法 雄性SD大鼠行5/6肾切除后，分别于术后第1、2、4、6、8和12周处死大鼠。采集血、尿和肾组织标本，PAS染色观察残肾病理改变；连续切片免疫组化染色观察HIF-1α、HIF-2α在肾脏中的表达部位；Western印迹检测二者的蛋白表达变化；RT-PCR检测靶基因血管内皮生长因子（VEGF）、血红素加氧酶1（HO-1）的mRNA水平变化。 结果 （1）大鼠5/6肾切除后第1周出现了短暂的急性肾衰竭[Scr（122.8±22.1） μmol/L]，之后Scr下降并进入稳定的慢性肾衰竭阶段[（66.0±3.7）～（66.4±8.4） μmol/L]，第6周后Scr进行性升高，残肾皮质出现进行性间质纤维化病变。（2）在肾切除早期阶段（术后第1周末），HIF-1α和HIF-2α表达即开始增加，其中HIF-1α仅在萎缩扩张的肾小管上皮细胞表达，HIF-2α则表达于血管内皮细胞、间质成纤维细胞和小动脉的平滑肌细胞；至第4和6周，两者表达到达峰值；此后，伴随Scr升高和病理损伤加重，两者表达逐渐下降。（3）HIF靶基因VEGF、HO-1的mRNA在第4和第6周时呈暂时性的高表达。 结论 CKD早期肾脏皮质HIF蛋白高表达和靶基因转录增加可能是对肾内缺氧的代偿性反应；CKD终末期HIF表达进行性减少，其在CKD进展中的作用值得进一步研究。

目的 研究慢性肾衰竭兔血清对其主动脉平滑肌细胞增殖和核因子κB （NF-κB）活化的影响，并探讨其作用的可能机制。 方法 建立慢性肾衰竭兔模型，采集血清。采用原代培养的兔主动脉平滑肌细胞，用不同浓度的慢性肾衰竭兔血清刺激不同时间，四甲基偶氮噻唑盐（MTT）法检测细胞增殖；Hoechst33342染色观察细胞凋亡；Western印迹检测慢性肾衰竭血清对主动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、NF-κB p65蛋白表达的影响；免疫荧光观察NF-κB p65核转位。 结果 （1）在较低浓度（≤10%）时，慢性肾衰竭兔血清对平滑肌细胞的增殖有明显的促进作用，且呈浓度、时间依赖性；但血清浓度继续增加后，对平滑肌细胞的促增殖作用却明显减弱，与正常血清组差异有统计学意义（P < 0.05）。（2）Hoechst33342染色表明，慢性肾衰竭血清在低浓度时（≤10%）细胞凋亡率和正常血清组差异无统计学意义（P > 0.05），但高浓度（>10%）时，平滑肌细胞凋亡率增加，与正常血清组差异有统计学意义（P < 0.01）。（3）慢性肾衰竭血清刺激24 h后，低浓度促进PCNA、NF-κB p65蛋白表达，高浓度抑制PCNA、NF-κB p65表达，与正常血清组差异有统计学意义（P < 0.01）。（4）10%慢性肾衰竭血清与平滑肌细胞孵育24 h后免疫荧光显示，NF-κB p65发生了核转位。 结论 不同浓度的慢性肾衰竭兔血清可导致平滑肌细胞增殖或凋亡，其促增殖作用可能与其活化了NF-κB有关。本研究为防治慢性肾衰竭加速性动脉粥样硬化提供理论依据。

目的 探讨脂联素（ADPN）及其受体（AdipoR）对糖尿病肾病的保护作用及其可能机制。 方法 （1）64只雌性SD大鼠被随机均分入对照组和实验组：实验组一次性空腹腹腔注射链脲菌素（STZ) 60 mg/kg，诱导糖尿病大鼠模型；对照组腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液。于糖尿病大鼠成模后第2、6、10、12周两组分别测体质量、肾质量、空腹血糖、24 h尿白蛋白排泄量；心内采血检测空腹血清胰岛素；ELISA法检测血、尿脂联素浓度；取肾脏常规制作PAS染色，免疫组化SP法检测肾脏脂联素受体1和2（AdipoR1和AdipoR2）的表达。（2）将NRK-52E细胞分别用含5 mmol/L葡萄糖（正常对照组）、30 mmol/L葡萄糖（高糖组）、30 mmol/L葡萄糖+不同浓度ADPN（终浓度分别为1 mg/L、5 mg/L、10 mg/L）培养，12 h后RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白1（MCP-1） mRNA表达。 结果 （1）造模成功后6、10、12周实验组血清和尿ADPN水平均高于对照组（P < 0.01），并随着肾脏病变进展而逐渐升高。（2）实验组各时期AdipoR1和AdipoR2在肾脏的表达高于对照组，并随时间逐渐增强，其与血清脂联素水平呈正相关（r = 0.666，P < 0.01；r = 0.684，P < 0.01）。（3）MCP-1 mRNA在高糖组表达较高，加入脂联素以后MCP-1 mRNA表达显著减少（P < 0.05）。 结论 血和尿脂联素水平随糖尿病肾病病程进展而升高，与AdipoR1和AdipoR2的表达亦呈正相关，推测脂联素通过AdipoR直接作用于肾小管，通过减少MCP-1的表达对肾脏起保护作用。

目的 应用抗肾小球基底膜（GBM）抗体的中和性单克隆抗体注射抗GBM肾炎大鼠，观察各种生化指标及肾脏病理学的变化。 方法 将Wistar大鼠随机分为5组，每组9只：(1)肾炎模型组：经尾静脉注入人抗GBM抗体；(2)正常对照Ⅰ组:经尾静脉注入非抗体性的健康人lgG；(3)对照Ⅱ组：经尾静脉注入抗GBM抗体的中和性单克隆抗体；(4)干预Ⅰ组：经尾静脉注入人抗GBM抗体，第7天后再经尾静脉注入抗GBM抗体的中和性单克隆抗体(1.5 ml/100 g)；(5)干预Ⅱ组：经尾静脉注入人抗GBM抗体，第14天后再经尾静脉注入抗GBM抗体的中和性单克隆抗体。分别在实验后第7、14、21天观察大鼠24 h尿蛋白量、BUN、Scr和肾组织病理学的变化。 结果 第21天干预Ⅰ组尿蛋白量为（16.62±5.53） g/d、BUN为（11.53±2.26） mmol/L、Scr为（102.46±16.86） μmol/L，均显著低于肾炎模型组（P < 0.05）；干预Ⅱ组较肾炎模型组也有所降低，但差异无统计学意义（P > 0.05）。干预Ⅰ组和干预Ⅱ组肾脏细胞增生、新月体的形成及免疫复合物的沉积均少于肾炎模型组，但干预I组更为明显。对照Ⅰ组和对照Ⅱ组之间无明显变化。 结论 早期应用抗GBM抗体的中和性单克隆抗体能够有效改善抗GBM肾炎大鼠的肾脏病变。