目的 了解具有两种遗传性疾病，即Fabry病并发薄基底膜肾病（TBMN）的临床病理和基因突变特点以及家系患病情况。 方法 总结分析本院收治的1例41岁女性Fabry病并发TBMN患者的临床病理特征和基因突变情况，同时对家系成员进行调查及相关检测。 结果 先证者呈现典型的Fabry病的肾外临床表现，包括皮疹、神经痛、眩晕、耳鸣、肥厚型心肌病等，同时亦有蛋白尿、镜下血尿及高血压等肾脏受累表现；肾活检光镜下病理改变为局灶性节段性肾小球硬化（FSGS），部分足细胞空泡变性；电镜下肾小球脏层上皮细胞胞质内多数髓磷脂小体形成，肾小球基底膜（GBM）弥漫性变薄，厚度为（216±31） nm。家系调查及基因突变检测显示先证者女儿除有典型Fabry病肾外表现外，亦有以血尿为主的肾脏症状。先证者的1个妹妹仅表现为镜下血尿。先证者及其女儿α-半乳糖苷酶 A（α-Gal A）活性分别为33和75活性单位（正常参考值为100~500活性单位），且2人均携带新发现的GLA基因突变——1208ins21 bp及COL4A3基因多态性——c:3627 G>A（p:M1209I）。仅表现为镜下血尿的先证者的妹妹仅携带COL4A3基因的c:3627 G>A（p:M1209I）多态性，α-Gal A活性正常，无GLA基因突变。 结论 对于Fabry肾病患者呈现血尿，尤其是表现为家族性血尿时，应考虑并认真排除并发TBMN的可能。

目的 探讨维持性血液透析（MHD）联合血液灌流（HP）治疗能否提高中、大分子毒素的清除率，能否改善MHD患者的生活质量并降低其病死率。 方法 采用前瞻性、随机、对照性研究。选取100例MHD患者，4周试验导入期后随机分为2组。HD+HP组（n=51）采取维持性单纯血液透析（2次/周）和HD+HP（1次/周）治疗；HD组（n=49）采取单纯血液透析（3次/周）治疗。平均随访2年。主要观察终点为患者死亡；次要观察终点为常规临床指标、瘦素、超敏C反应蛋白（hsCRP）、白细胞介素6（IL-6）、β2微球蛋白（β2-MG）、甲状旁腺激素（PTH）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和SF-36量表生活质量指数。 结果 2年观察期结束时，HD+HP组患者的瘦素、hsCRP、PTH、IL-6、β2-MG和TNF-α 的血清浓度和收缩压、舒张压、心率、心胸比、左室质量指数（LVMI）、EPO剂量和降压药的种类均低于HD组（均P < 0.05）；HD+HP组患者的血红蛋白（Hb）浓度、左心室射血分数（EF）、体质量指数（BMI）均高于HD组（均P < 0.05）；2组患者的血清白蛋白（Alb）浓度、血清铁（SI）浓度、总铁结合力（TIBC）、Kt/V、每分心输出量（CO）和二尖瓣峰值流速比（E/A）差异均无统计学意义。2年观察期结束后，SF-36量表显示HD+HP组患者的生活质量明显好于HD组，总评价值显示HD+HP组患者总分高于HD组（P < 0.05）。2年观察期间的Kaplan-Meier生存曲线显示HD+HP组患者具有明显的生存优势，Log-rank检验P < 0.05。HD+HP组患者行HD+HP时未发生严重的不良反应。 结论 HD+HP清除患者体内中大分子毒素的效果明显优于单纯性HD，同时在改善MHD患者的生活质量和提高其生存率方面有潜在的优势。

目的 评价小剂量反复多次低分子右旋糖酐铁和蔗糖铁静脉用药后对慢性肾衰竭大鼠氧化应激的影响。 方法 以5/6肾大部切除术建立慢性肾衰竭大鼠模型。右肾切除术后第4周，将实验大鼠分为4组：低分子右旋糖酐铁（糖酐铁）组、蔗糖铁组、对照组、假手术组。观察6周，检测各组大鼠体内氧化应激、铁代谢等指标。 结果 糖酐铁组和蔗糖铁组大鼠血红蛋白明显高于对照组（P < 0.05），而两铁剂组间差异无统计学意义。对照组大鼠的血清铁、血清铁蛋白、转铁蛋白饱和度显著低于假手术组（P < 0.05）；两铁剂组大鼠上述指标均显著高于对照组（P < 0.05），而两铁剂组间差异无统计学意义。糖酐铁组和蔗糖铁组血浆晚期氧化蛋白产物（AOPP）显著高于对照组[（127.84±21.19） μmol/L、（134.21±29.38） μmol/L比 （81.83±19.93） μmol/L，P < 0.05]，而两铁剂组间差异无统计学意义。两铁剂组大鼠血浆丙二醛（MDA）高于对照组，而蔗糖铁组高于糖酐铁组[（6.06±0.73） nmol/L比（4.99±0.80） nmol/L， P < 0.05]。糖酐铁组、蔗糖铁组和对照组大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（TAOC）差异无统计学意义。模型组大鼠血浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平显著低于假手术组（P < 0.05），而蔗糖铁组显著低于糖酐铁组和对照组[（2123.11±74.78） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1比（2352.84±163.90） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1、（2310.23±125.99） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1，P < 0.05]。 结论 静脉补铁可部分纠正5/6肾大部切除肾衰竭大鼠的贫血，改善铁代谢指标。反复静脉小剂量补铁对慢性肾衰竭大鼠氧化应激状态有不良影响，而低分子右旋糖酐铁的不良影响低于蔗糖铁。

目的 观察可溶性尿酸（UA）直接作用于血管内皮细胞后，对不对称二甲基精氨酸（ADMA）生成和二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH-2）表达的影响，探讨ADMA-DDAH路径在尿酸引起的血管内皮损伤中的作用。 方法 人脐静脉内皮细胞（HUVEC）在含不同浓度UA（0、60、120 mg/L）的培养液孵育下，选取6 h和24 h为研究时间点，应用ELISA法和高压液相质谱分析（HPLC）技术检测细胞上清液中ADMA的浓度；应用RT-PCR、免疫荧光（IF）和蛋白印迹法（WB）检测内皮细胞DDAH-2的表达；应用流式细胞技术检测细胞内2’，7’-二氯荧光素（DCF）的荧光强度，用以评估内皮细胞活性氧簇（ROS）的生成。分别收集并检测经UA（0、60、120 mg/L）单独刺激和与干预剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）（UA 120 mg/L+NAC 10 mmol/L）共孵育24 h后各组细胞内的DDAH-2蛋白水平，并将其与ADMA标准品在37℃共孵育2 h，根据ADMA的降解量，间接评估不同浓度尿酸作用对内皮细胞DDAH-2蛋白活性的影响。 结果 UA以浓度依赖的方式上调ADMA的表达， 并且在相同浓度下，刺激24 h 比6 h更显著地上调ADMA的表达（均P < 0.05 ）。UA浓度、作用时间的改变对细胞内DDAH-2表达的影响无明显差异（均P > 0.05）。高UA组作用24 h后细胞内ROS生成比低UA组增多 （P < 0.05），DDAH-2活性降低（P < 0.05），此效应可被NAC的干预所阻断。 结论 高浓度UA可促进内皮细胞ROS生成，从而导致DDAH-2活性的降低和ADMA降解的减少，而干预内皮细胞NO的合成。据此推论，高尿酸损伤内皮细胞可能有DDAH-ADMA轴的参与。

目的 研究氧化应激在糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用，探讨抗氧化剂普罗布考对大鼠DN的肾脏保护作用。 方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、DN组和普罗布考干预组（1％普罗布考饮食），每组10只。分别于第3周、第8周及第12周检测24 h尿蛋白（UTP）；12周末检测各组大鼠血糖、血脂（胆固醇、三酰甘油）、Scr、肌酐清除率（Ccr）、肾脏组织匀浆液丙二醛（MDA）含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。肾组织病理切片行 HE和Masson染色；采用免疫组化和Western印迹检测肾组织核转录因子Sp1、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及E钙黏蛋白（E-cadherin）表达。 结果 与正常对照组比较，DN组血糖、Scr、肾组织匀浆MDA和24 h UTP水平显著增高（均P < 0.01），Ccr显著降低（P < 0.01）；肾组织肾小管损伤分数、α-SMA和 Sp1蛋白表达水平明显增高（均P < 0.01）；肾组织E-cadherin蛋白表达明显下调。肾组织MDA含量分别与α-SMA及Sp1蛋白表达呈正相关（r ＝ 0.896，P < 0.01；r ＝ 0.862，P < 0.01），与E-cadherin蛋白表达呈负相关（r = -0.673， P < 0.01）。普罗布考干预组Scr、24 h UTP、肾组织MDA、肾小管损伤分数及肾组织α-SMA、 Sp1蛋白表达水平较DN组均明显降低（均P < 0.01）；Ccr和肾组织E-cadherin蛋白表达水平较DN组均明显增加（均P < 0.01）。 结论 氧化应激在DN大鼠肾小管上皮细胞转分化中起重要作用。普罗布考可能通过抗氧化、下调肾组织Sp1蛋白表达及抑制肾小管上皮细胞转分化延缓DN大鼠肾脏病变进展。

目的 探讨垂体中叶素（IMD）对肾脏缺血再灌注（I/R）大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响及相关机制。 方法 健康雄性Wistar大鼠24只随机分为假手术组、I/R组、空质粒组、IMD质粒组。动物右肾切除后，采用超声微泡法，将空质粒或IMD质粒转染入左肾，1周后制作肾脏I/R模型。TUNEL法测定细胞凋亡；半定量RT-PCR检测Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平；比色法检测caspase-8、-9的活性；Western印迹法检测caspase-3蛋白的表达水平。 结果 与假手术组相比，I/R组细胞凋亡率增高，Bax、Fas mRNA表达增加，bcl-2 mRNA表达下降，caspase-8、-9活性增强，caspase-3蛋白表达增加（均P < 0.05）。与I/R组相比，IMD转染组细胞凋亡率明显降低，Bax、Fas的mRNA表达下降，bcl-2的mRNA表达增加，caspase-8、-9活性减弱，caspase-3蛋白表达减少（均P < 0.05）。转空质粒组与I/R组比较，各指标差异均无统计学意义。 结论 IMD能上调bcl-2表达，降低bax、Fas的表达，降低caspase-8、-9活性，从而抑制肾脏I/R损伤所诱导的凋亡。

目的 探讨近曲小管肝型脂肪酸结合蛋白（L-FABP）对骨髓移植诱导的小鼠IgAN的肾脏保护作用。 方法 通过骨髓移植在肾小管高表达人类L-FABP（hL-FABP）基因的转基因鼠（Tg）和相同背景的野生鼠（WT）上重建IgAN。受体鼠分别在骨髓移植后第6和12周处死，留取肾脏标本。用实时荧光定量PCR方法检测肾脏hL-FABP、纤连蛋白（FN）和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的 mRNA表达；免疫组化法检测hL-FABP和FN的蛋白表达分布；Western印迹法检测hL-FABP、4-羟壬烯醛（4-HNE）、血红素加氧酶1（HO-1）、FN、Ⅳ型胶原的蛋白表达水平；ELISA法检测血清IgA、尿白蛋白和尿hL-FABP水平。 结果 骨髓移植在受体转基因鼠（Tg-ddY）和野生鼠（WT-ddY）上均重建了IgAN，血清IgA水平升高伴有系膜区IgA沉积，组间差异无统计学意义。正常Tg鼠的肾小管表达hL-FABP。与正常Tg鼠相比，骨髓移植后第6周，Tg-ddY鼠肾脏hL-FABP的mRNA（1.62±0.32比0.46±0.09，P < 0.01）和蛋白 （1.74±0.76比1.14±0.31，P < 0.01）表达水平显著上调，伴有尿hL-FABP水平（?滋g/g肌酐）显著升高（59.87±26.75比31.01±14.86，P < 0.05）。与Tg-ddY鼠相比，WT-ddY鼠在第12周出现明显的白蛋白尿（mg/L）（828±656比82±22，P < 0.01）、明显的系膜基质扩张（P < 0.01），并在肾小球出现更多的FN及Ⅳ型胶原沉积。Tg-ddY鼠的肾脏HO-1和4-HNE修饰蛋白（均 P < 0.05）以及MCP-1 mRNA的表达（P < 0.01）被显著抑制。 结论 肾小管L-FABP可能通过抑制氧化应激和炎性介质的产生减轻肾小球损伤，在IgAN早期发挥了肾脏保护作用。

目的 探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）表达变化对系膜细胞增殖的影响。 方法 设计合成大鼠Skp2 siRNA和对照siRNA、pIRES-GFP-Skp2质粒和pIRES-GFP质粒。采用脂质体转染法进行细胞转染。半定量PCR和Western印迹法检测Skp2的mRNA、蛋白表达。原代培养的大鼠系膜细胞以每孔3000个接种于96孔板，分为以下6组：（1）无血清组；（2）20％胎牛血清（FCS）组；（3）10％FCS+pIRES-GFP质粒转染组；（4）10％FCS+pIRES-GFP-Skp2质粒转染组；（5）20％FCS+对照siRNA组；（6）20％FCS+Skp2 siRNA组。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞相对活力和相对细胞数；BrdU标记法检测S期细胞；流式细胞仪检测细胞周期。 结果 半定量PCR法结果显示，与阴性对照siRNA组相比，Skp2 siRNA转染后Skp2 mRNA表达显著下调。Western印迹结果显示，与pIRES-GFP质粒转染组相比，pIRES-GFP-Skp2质粒转染后Skp2蛋白表达显著上调。MTT、BrdU和细胞周期分析显示，与相应对照组相比，Skp2质粒转染后相对细胞数增加（A值：0.419±0.088 比 0.305±0.036，P ＜ 0.01）、S期细胞数增多（BrdU 阳性细胞：0.21±0.04比0.15±0.03，P ＜ 0.01；S期细胞数：20.18±0.64比14.33±0.37，P ＜ 0.01）；Skp2 siRNA转染后相对细胞数减少（A值：0.328±0.069比0.482±0.133，P ＜ 0.01）；S期细胞数减少（BrdU 阳性细胞：0.17±0.01比0.24±0.00，P ＜ 0.01；S期细胞数：16.52±0.75比23.81±1.25，P ＜ 0.01）。 结论 Skp2过表达促进系膜细胞增殖，下调Skp2表达可抑制系膜细胞增殖。

目的 观察急性肾损伤（AKI）后恢复过程中肾组织内Wnt-β-catenin信号分子表达的分布及变化， 探讨Wnt-β-catenin信号通路在AKI修复过程中的作用。 方法 (1)应用BAT-gal转基因报告鼠建立急性肾缺血再灌注损伤（IRI）模型, 在IRI后1 d断尾取血，并于IRI后第2和7天处死报告鼠取血并收集肾脏标本。肾组织切片行PAS染色观察肾病理改变及X-gal-LTL(近曲小管标记物)、X-gal-NKCC2（髓袢标记物）、X-gal-DBA（集合管标记物）免疫荧光组织化学双重染色，观察Wnt-β-catenin信号的分布、表达与变化。(2)应用野生型小鼠建立IRI模型，于IRI后第2、5、7天处死小鼠获取肾脏标本用Western 印迹方法检测Wnt4及其共同受体低密度脂蛋白受体相关蛋白6（Lrp6）的表达水平。 结果 IRI小鼠肾损伤后第2天，PAS结果显示损伤肾脏的肾小管上皮细胞排列紊乱,可见明显的肾小管上皮细胞脱落及基底膜裸露,管腔内可见脱落的细胞和细胞碎片；7 d时小鼠肾小管上皮细胞损伤面积较2 d时明显缩小。X-gal染色显示第2天损伤的肾脏皮质和外髓质层中可见少数肾小管出现Wnt信号的表达，间质中Wnt信号的反应较高，第7天与第2天比较，Wnt信号表达明显增强。Western印迹结果显示，Wnt4于IRI后2 d增高，第5、7天亦较第2天明显增高；其共同受体磷酸化Lrp6代表激活的Wnt-β-catenin信号，在IRI 2 d后明显增高，而在无损伤成鼠肾组织中未检测到。免疫双染提示主要是近曲小管和髓袢的上皮细胞对Wnt信号通路应答。 结论 急性肾损伤时Wnt-β-catenin信号通路被激活，可能参与了肾小管上皮细胞的修复机制。