目的 初步探讨血清与尿液中血管生成素样蛋白3（ANGPTL3）和4（ANGPTL4）在原发性肾病综合征（PNS）中的临床意义。 方法 收集2012年9月至2013年8月复旦大学附属儿科医院肾脏风湿科PNS住院患儿180例为研究对象，纳入健康体检儿童18例为对照组。运用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清及尿液样本中ANGPTL3和4的浓度；采用全自动生化分析仪检测尿蛋白 （Up）、尿肌酐（Ucr）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、三酰甘油（TG）及总胆固醇（TC）浓度；采用SPSS 19.0软件进行统计分析。 结果 （1）PNS患儿血ANGPTL3的水平高于健康儿童[1210.95（671.28～1571.87） μg/L比308.20（230.05～372.26） μg/L，P＜0.01]；PNS患儿尿ANGPTL4/Cr的水平高于健康儿童[115.57（26.50～129.81）ng/g比11.26（2.23～15.11）ng/g，P＜0.01]；PNS患儿尿ANGPTL3/Cr值及血ANGPTL4水平与健康儿童相比差异均无统计学意义。（2）PNS患儿组血ANGPTL3水平和发病年龄（r=0.199，P=0.047）、病程（r=0.501，P=0.027）、24 h尿蛋白量（r=0.384，P=0.004）、Up/ Ucr（r=0.367，P=0.006）、TG（r=0.314，P=0.021）及TC（r=0.444， P=0.001）呈正相关；控制血脂因素后，PNS患儿血ANGPTL3仍与24 h尿蛋白量（r=0.348，P＜0.001）、Up/Ucr（r=0.312，P＜0.001）呈正相关；尿ANGPTL4/Cr与24 h尿蛋白量（r=0.318，P=0.019）及Up/ Ucr（r=0.117，P=0.044）呈正相关。（3）ANGPTL3和ANGPTL4水平与PNS激素治疗反应及复发情况无相关性，然而同一例激素依赖频复发NS患儿在激素治疗的不同时期，血ANGPTL3水平变化与尿蛋白变化趋势一致。（4）在蛋白尿程度、血脂水平相对一致的前提下，PNS患儿中，病理类型不同，其血ANGPTL3水平也不同。 结论 血ANGPTL3水平可能是反映PNS发病情况、蛋白尿程度、病理类型及激素药物治疗后蛋白尿转归的重要指标之一。尿ANGPTL4水平与PNS患儿尿蛋白水平正相关，可能也具有一定的临床参考价值。
目的 探讨维持性血液透析（MHD）患者血清骨硬化蛋白（Sclerostin）水平与矿物质代谢紊乱、骨病变和腹主动脉钙化的相关关系。 方法 病例来自上海交通大学医学院附属仁济医院的维持性血液透析患者175例，酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清Sclerostin水平；超声定量法检测跟骨骨密度（BMD）；腹部侧位平片检查腹主动脉钙化。收集患者的临床资料和血生化指标，分析血清Sclerostin水平与MHD患者矿物质代谢紊乱、骨病变和腹主动脉钙化的相关关系。 结果 175例患者血清Sclerostin中位数为160.50（100.67，256.39） pmol/L。单因素相关分析显示，血清Sclerostin水平与年龄、体质量指数（BMI）、血钙、25（OH）维生素D呈正相关，与单室尿素清除指数（spKt/v）、全段甲状旁腺素（iPTH）呈负相关（均P﹤0.05）。逐步多元线性回归分析显示性别、年龄、BMI与lg[Sclerostin]呈正相关，lg[iPTH]与lg[Sclerostin]呈负相关。骨密度正常（T值≥-1s）组患者的Sclerostin水平显著高于骨密度低下（T值＜-1s）组患者[201.13（107.40，327.84） pmol/L比142.97（99.52，226.02） pmol/L，P=0.035]。单因素相关分析显示MHD患者血清Sclerostin水平与跟骨BMD呈正相关（r=0.227，P=0.003）。Logistic回归分析显示Sclerostin水平与发生骨密度低下风险呈负相关[OR=0.241，95%CI（0.078，0.749），P=0.014]。Sclerostin水平与腹主动脉钙化评分无明显相关。 结论 MHD患者血清Sclerostin水平与iPTH水平呈负相关，与跟骨骨密度呈正相关，与腹主动脉钙化无相关。Sclerostin有可能成为反映MHD患者骨转化水平的标志物。
目的 检测不同CYP3A5基因型的特发性膜性肾病患者应用他克莫司（TAC）后达到目标血药物浓度时的用药剂量，明确不同基因型与药物用量间的关系，初步探索TAC的最佳初始用药剂量。 方法 采用回顾性分析的方法，病例来自滨州医学院附属医院肾内科确诊的特发性膜性肾病患者60例，荧光染色原位杂交（FISH）法检测CYP3A5基因型。依据基因型将患者分为AA、AG、GG 3组。均相酶扩大免疫分析法（EMIT）测定患者他克莫司的全血谷浓度（C0）；比较3组患者用药后8、12、16、24周时他克莫司全血谷浓度（C0）、用药剂量、全血谷浓度与用药剂量（C0/D）的比值。按照临床疗效分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）和无效（NR）3组，比较各访视点患者的TAC药代动力学指标。 结果 60例特发性膜性肾病患者CYP3A5基因多态性（A6986G）G的基因频率为53.33%，其中AA组12例（20%）；AG组32例（53.33%）；GG组16例（26.67%）。3组患者他克莫司用药8、12、16、24周后的用药剂量、全血谷浓度/用药剂量比值的差异有统计学意义（均P＜0.05）。AA组患者他克莫司用药剂量约为GG组的2～3倍，AG组约为GG组的1～2倍。治疗24周AA组患者的缓解率显著低于AG、GG组（16.67%比81.25%、16.67比87.25%，均P＜0.001）。CR、PR组的C0以及C0/D值均较NR组高，且随用药时间延长而升高，但组间差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 CYP3A5基因多态性与他克莫司血药浓度明显相关，CYP3A5基因型检测对指导特发性膜性肾病患者的个体化用药有一定临床实用价值。
目的 描述Ⅲ型原发性高草酸尿症（PHⅢ）1例患儿的临床特征并对该家系进行致病基因突变分析研究。 方法 通过直接测序法对该家系可疑突变基因AGXT、GRHPR和HOGA1进行直接测序分析。以100例健康人作为对照。 结果 患儿发病早（0.8岁），临床表现以肾结石和梗阻性肾病为主，但肾钙质沉着症表现轻微。实验室检查发现患儿有显著的高草酸尿、高钙尿和低枸橼酸尿。HOGA1基因分析发现2个新的杂合突变（复合杂合），一是位于6号外显子最后1位和6号内含子第1位连续2个bp的突变（c.834_834+1GG＞TT）；另一个是位于6号外显子最后1位碱基鸟嘌呤突变为腺嘌呤（c.834G＞A）。这2个突变很可能导致剪切突变。100例非相关的健康人未发现存在相同突变。另外，该患儿还携带1个单核苷酸多态性（SNP） （c.715G＞A，p.V239I）。其他2个候选基因AGXT和GRHPR未发现可疑突变。 结论 新发现2个剪切突变位点与PHⅢ有关。这是亚洲首次报道PHⅢ患者及其突变基因分析。
目的 初步探讨重症肾性继发性甲状旁腺功能亢进（secondary hyperparathyroidism，SHPT）合并Sagliker综合征（Sagliker syndrome，SS）的临床特点和相关危险因素。 方法 纳入2011年2月至2015年4月在安徽医科大学第二附属医院肾脏内科确诊重症肾性SHPT患者229例，其中SS组33例，余196例为对照组。比较两组患者在年龄、性别等人口学资料、并发症及血清学指标方面的差异，分析导致SS可能的危险因素。 结果 SS组患者中位透析龄为11年，显著长于对照组（8年），差异有统计学意义（P＜0.001）；与对照组比较，SS组患者血肌酐、血尿素氮、白蛋白、血磷水平较低，而全段甲状旁腺激素（iPTH）、铁蛋白、超敏C反应蛋白、碱性磷酸酶（ALP）、心瓣膜及腹主动脉钙化比例较高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；单因素Logistic回归分析结果显示，长透析龄（＞10年，OR=6.182，P=0.002）、高ALP（＞347 U/L，OR=5.786，P=0.002）、高iPTH（＞1764 ng/L，OR=4.960，P=0.001）、心瓣膜及腹主动脉钙化（OR=8.635，P＜0.001；OR=5.039，P=0.001）均是发生SS的危险因素，高血清白蛋白是SS的保护因素（OR=0.904，P=0.014）；多因素回归分析结果显示，长透析龄（＞10年，OR=5.121，P=0.036）、高iPTH（＞1764 ng/L，OR=4.130，P=0.017）、心瓣膜钙化（OR=11.714，P＜0.001）是SS的独立危险因素。 结论 长透析龄及高iPTH是重症SHPT患者发生SS的独立危险因素。
目的 比较简化MDRD公式与慢性肾脏病学流行病学合作研究（CKD-EPI）公式在评估外周动脉疾病（peripheral arterial disease，PAD）患者肾小球滤过率（GFR）中的适用性。 方法 采用回顾性队列研究，选择2005年在上海市和北京市8家医院被确诊为PAD的841例患者作为研究对象，分别利用MDRD与CKD-EPI公式估算肾小球滤过率（eGFR），应用Spearman相关性检验、Bland-Altman曲线和Kappa检验比较两种方程估算GFR的相关性和一致性，并利用净重新分类指数（net re-classification improvement，NRI）比较2个公式对死亡风险的评估能力。 结果 eGFRMDRD高于eGFRCKD-EPI，均值差为4.33 ml•min-1•(1.73 m2)-1，但两者评估eGFR值的相关性和一致性良好（Kappa值为0.749，r=0.991，P＜0.05）。以MDRD为标准，CKD-EPI公式改变了152例（18.1%）患者的分期，其中9例（1.1%）分期上调，143例（17.0%）分期下调。全因死亡NRI为0.059（P＜0.05），心血管死亡NRI为0.022（P＞0.05），提示CKD-EPI公式仅对全因死亡的风险评估能力优于MDRD。 结论 CKD-EPI公式在PAD患者中的应用并未显著优于MDRD公式。
目的 观察白蛋白对肾小管上皮细胞中NLRP3炎性体及其下游炎性因子IL-1β和IL-18表达的影响。 方法 选取30例不同蛋白尿水平的系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）患者肾活检组织，分别用PAS和Masson染色观察肾小管间质损伤和炎性细胞的浸润情况；用免疫组化的方法检测其肾小管上皮细胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的表达情况，以及间质中浸润的不同炎性细胞。体外实验用高浓度的牛血清白蛋白（BSA，20 g/L）刺激HK-2细胞，采用Western印迹和实时荧光定量PCR方法观察NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白和mRNA表达水平的变化。 结果 高蛋白尿组MsPGN患者的肾小管损伤和炎性细胞浸润程度明显重于低蛋白尿组（均P＜0.05），肾小管上皮细胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的表达也明显高于低蛋白尿组（均P＜0.05），且IL-1β和IL-18的表达量与24 h尿蛋白量呈正相关（r=0.836，P＜0.05；r=0.901，P＜0.05）。体外BSA刺激HK-2细胞24 h后，NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白和mRNA水平均明显高于对照组（均P＜0.05）。 结论 白蛋白可引起肾小管上皮细胞中NLRP3炎性体的激活，这可能是蛋白尿导致肾小管间质损伤和炎性反应的机制。
目的 观察氧化低密度脂蛋白（oxidized LDL，Ox-LDL）刺激对体外培养的小鼠肾小球足细胞清道夫受体A（scavenger receptor A，SR-A）表达的影响，并初步探讨其可能的分子机制。 方法 体外培养小鼠条件永生性足细胞，以不同浓度Ox-LDL刺激足细胞24 h及以20 mg/L Ox-LDL干预不同时间，酶法检测细胞内胆固醇含量，采用实时荧光定量PCR、Western印迹法检测正常对照组、Ox-LDL刺激组SR-A、nephrin、PTEN的mRNA和蛋白表达水平；DiI标记的氧化低密度脂蛋白（DiI-Ox-LDL）与足细胞共孵育，免疫荧光观察足细胞对脂质的摄取情况。进一步采用PTEN抑制剂bpv（hOpic）[dipotassium bisperoxo（5-hydroxypyridine-2-carboxyl）oxovanadate（V）]、PTEN siRNA以及PTEN腺病毒（adPTEN）双向调控PTEN的表达，观察SR-A、nephrin的表达、足细胞对脂质的摄取情况及细胞内胆固醇含量的变化。 结果 小鼠足细胞表达SR-A受体并介导脂质摄取；与对照组相比，Ox-LDL刺激上调足细胞SR-A表达的同时伴有PTEN、nephrin表达下降（均P＜0.05），且与Ox-LDL的浓度及作用时间相关；增加PTEN表达能抑制Ox-LDL诱导的SR-A表达水平上调和脂质摄取（均P＜0.05），降低细胞内胆固醇含量（P＜0.05），上调裂孔隔膜蛋白nephrin的表达（均P＜0.05）；与之相反，抑制PTEN表达能进一步上调Ox-LDL诱导的SR-A表达，促进脂质摄取，增加细胞内胆固醇含量（均P＜0.05），并进一步降低nephrin的表达（均P＜0.05）。 结论 Ox-LDL可能通过PTEN调控SR-A表达进而调控脂质摄取，导致足细胞损伤。
目的 检测长链非编码RNA（lncRNA）在转化生长因子β（TGF-β）诱导的肾小球系膜细胞增生中的改变，探讨lncRNA在系膜增生性肾小球肾炎发病中的作用。 方法 用TGF-β刺激建立系膜细胞增生模型。采用细胞增殖实验筛选TGF-β诱导肾小球系膜细胞增生的最佳浓度；用芯片技术筛选TGF-β刺激组与对照组有差异表达的lncRNAs；采用生物信息学分析法分析lncRNAs芯片结果，用RT-PCR法验证差异表达的lncRNAs，再根据生物信息学分析结果推测靶基因，用RT-PCR法验证。 结果 细胞增殖实验结果显示，10 ng/ml TGF-β为刺激细胞增殖最佳浓度。芯片筛选结果显示，TGF-β刺激组和对照组约30 000多个 lncRNAs表达，TGF-β刺激组有5550 个lncRNAs差异表达于对照组，其中119个和147个lncRNAs上调或下调超过2倍。根据lncRNA筛选原则选取部分lncRNAs用RT-PCR法验证。结果提示：与对照组相比，TGF-β刺激组细胞uc.60、MRAK079149、MRAK029456、XR_005507、XR_007641、uc.14和uc.412的表达明显上调；BC088254、DQ402472、BC098733、BC158832、BC098746表达明显下调，与芯片检测结果一致。生物信息学分析结果显示uc.412和MRAK079149的下游靶基因分别为抗凋亡转录因子（AATF）和NimA相关激酶8（NeK8），RT-PCR验证结果提示：与对照组比较，TGF-β刺激组AATF和NEK的表达显著上调（P＜0.05）。 结论 体外TGF-β诱导的系膜细胞增生模型中存在lncRNAs的差异表达。
